293T/17人胚肾细胞

产品编号：CL-687h

细胞特性

形态：上皮细胞样，贴壁生长

含量：>1x10⁶cells

规格：T25瓶x1（常温运输）/ 2mL冻存管x2（干冰运输）

用途：仅供科研使用

培养基及培养冻存条件准备

收货须知

收货当天发现异常，请在24小时内及时联系客服，逾期视为收货良好！

冻存管形式：收货后及时置于-80℃冰箱保存，若长时间不使用，应过夜转移至液氮。复苏时每管一次用完不得留存；

T25形式：收货后于培养箱中静置2-3h，再对细胞进行常规操作。请严格按照本说明操作，否则造成细胞失活等情形，不予提供补发服务。

细胞复苏、传代、冻存操作

（一）细胞复苏

①　冻存管从液氮或-80℃中取出放入 PE 手套中，迅速没入 37℃水浴锅，摇晃冻存管加速溶解，以 1 min内全部溶解为宜；

②　在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有 9ml 完全培养基的离心管内，1000-1200rpm/min 离心 5 分钟，弃去上清液，用 1-2mL 完全培养基重悬细胞；

③　然后将细胞悬液加入到含有 5-6mL 完全培养基的 T25 瓶中，放入培养箱培养。

（二）细胞传代

①　将旧培养液吸除，PBS 清洗两遍后，加入 1-2mL 胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；

②　镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（可用吸管吸起些许胰酶轻轻吹打细胞层某处，肉眼可见细胞层脱落，即消化完成，否则继续消化），直接吸掉胰酶，加入 5-6 mL完全培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散；

③　将细胞悬液按 1:2 比例分到新的 T25 瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；

④　注意培养基 PH 值变化和细胞密度，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%-90%时，重复第 1 项操作或者冻存。

    注意事项：

    ① 细胞具有密度依赖性，首次传代（密度达到 80%），建议 1:2 传代（保持细胞密度），且优先在 T25 瓶中。

    ② 密封培养瓶的话，处理完后放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松。