 siRNA合成试剂盒in vitro Transcripti
| ■ 制品内容 (50次量，20 μl反应体系) | | 10×Transcription Buffer | 100 μl | | T7 RNA Polymerase (50 U/μl) | 100 μl | | RNase Inhibitor (40 U/μl) | 25 μl | | ATP Solution (50 mM) | 100 μl | | GTP Solution (50 mM) | 100 μl | | CTP Solution (50 mM) | 100 μl | | UTP Solution (50 mM) | 100 μl | | RNase free DNase I (5 U/μl) | 200 μl | | Control Template (50 ng/μl) | 20 μl | | RNase T1 (100 U/μl) | 25 μl | | RNase T1 Dilution Buffer | 700 μl | | RNase free dH2O | 1 ml | | 10×Annealing Buffer* | 500 μl | | | | * 二条Oligo DNA退火时使用。 | | Buffer组成：100 mM Tris-HCl (pH8.0)，500 mM CH3COOK，10 mM EDTA。 |
| | | | ■ 制品说明 | 本制品是利用T7 RNA Polymerase进行体外转录 (in vitro transcription)，大量合成siRNA的试剂盒。试剂盒使用了T7 RNA Polymerase，以含有T7 Promoter序列的线型双链DNA为模板，可以对Promoter下游的DNA序列进行转录，高效合成单链RNA。试剂盒中附带有Control Template (线型Plasmid DNA)，以20 ng的Control Template为模板，在20 μl的转录反应体系中，可以合成约10 μg的2 kb单链RNA。
另外，本试剂盒含有RNase T1，该酶可特异性切断单链RNA的鸟苷酸3’端的磷酸。体外转录反应后可以合成siRNA。
(注意) 本试剂盒适用于合成大量RNA，不推荐用于制作高比活性的RNA probe。 | | | | ■ 保存 | | -20℃。 | | | | ■ 实验操作注意 | 1. 反应体系中须严格注意不要混入RNase。
2. 实验器材 (如：枪头、Microtube等) 注意严格使用RNase Free用品。
3. 实验操作时请注意戴一次性手套，防止RNase污染。 |
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