
严格的对比实验研究表明,巅峰蛋白酶K与现有市场上林伯氏白色念球菌来源的蛋白酶K产品相比,对大片段蛋白质的切割能力基本相同,而在小片段蛋白的降解能力方面较其他产品活力高出50%以上。
巅峰蛋白酶K的一般工作浓度是50-100μg/ml。在较广的pH范围内(pH4-12.5)均有活性。推荐反应缓冲液为50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。孵育温度为55至65℃,理想孵育温度为58℃;孵育时间为15分钟至48小时,理想孵育时间为2小时。在0.2-1%SDS或约10mM尿素存在的情况下,蛋白酶K显示更高的酶活性。常用浓度的EDTA、Triton X-100、Tween 20、Sarkosyl、盐酸胍对蛋白酶K的活力影响不大。
巅峰蛋白酶K配制标准:20mg/ml。将200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中,轻轻摇动,直至酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。巅峰蛋白酶K的保存:保存在-20℃冰箱里,避免反复冻融,有效期可达12月以上。