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缩霸TM 大分子快速浓缩体系
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品牌 leeann
过期 长期有效
更新 2025-08-12 17:55
 
详细信息
 一、产品概述     
      缩霸TM 介质是一种含交联网孔的干燥高分子颗粒,它与分子量大于7000 的大分子溶液相遇时,能够自发而快速地吸入分子量7000 以下的溶剂(如水)及小分子溶质(如盐及缓冲物质),同时把该大分子排堵在交联网孔之外而形成浓缩液,再经过简单过滤离心滤去湿化的介质,即可收集到该大分子浓缩液。
      理化性能惰性的缩霸TM 介质可以用于浓缩各种生物大分子体系,如核酸、多糖、脂蛋白、脂聚集体、核糖体、细胞器、外泌体及病毒等,但它特别适合各种活性敏感的蛋白质如抗体、酶及受体等5 至7 倍的浓缩。
蛋白质浓缩是生物医学领域最基本最常用的技术之一,目前主要用超滤浓缩方法。然而,对比蛋白质超滤浓缩这个现行标准,缩霸TM 技术具有下列显著优势:
   
技术指标 缩霸TM 超滤
成功率 分散在整个蛋白质液样里的缩霸TM
介质总体上具有过量交联网孔,能快
速无堵塞地吸入水溶液及小分子盐
及缓冲物质,所以浓缩过程通畅,无
蛋白质堵塞网孔导致的失败现象。可
以无堵塞地浓缩粘稠蛋白质样。还可
以无堵塞地浓缩浑浊粗液,其中的颗
粒可被介质拦截而清澈化浓缩液。
用压力迫使大液样体积相的小分
子溶剂和溶质从滤膜的有限二维
平面空间通过,该滤膜承受了过大
的过滤负担,因而其滤孔容易被蛋
白质大分子堵塞,浓缩过程失败率
高。不能浓缩粘稠度高的蛋白质液
样,亦无法浓缩含颗粒的浑浊蛋白
质粗液。
活性友好度
与回收率
缩霸TM 介质在整个液体空间里均匀
而温和地浓缩蛋白质,没有蛋白质浓
度极化现象,也没有引诱蛋白质变性
的极端条件。相反,蛋白质变性过程
中的失活中间体的水化层被缩霸TM
介质快速吸走后,该中间体的松散构
象发生紧缩,从而促使它复性,提高
了浓缩样的比活性。总之,缩霸TM
方法可以保证蛋白质浓缩液的质量
以及活性的高回收率。
滤膜上蛋白质局部浓度过高,有不
可逆聚集而使样品失活并报废的
危险。高效率回收聚集在膜附近的
高浓度蛋白质并不容易,尤其这个
局部蛋白质浓液的粘稠度比较高
时,常常使蛋白质浓缩液损失严重
而大大降低回收率。超滤系统的压
力及剪切力亦容易导致蛋白质变
性。总之,超滤方法不保证蛋白质
浓缩液的质量及活性的高回收率。
速度 整个浓缩过程不超过10 分钟 通常要30 分钟以上
成本 经济 昂贵

二、产品规格
根据待浓缩的蛋白质液样体积不同,我们提供小体积和大体积两种规格:
编号 描述 规格
P0801 缩霸TM 大分子快速浓缩体系,0.6 毫升 缩霸TM 介质10 克,小滤膜管100 个,小
外管100 个。
P0802 缩霸TM 大分子快速浓缩体系,12 毫升 缩霸TM 介质50 克,大滤膜管5 个(可清
洗并重复使用)。用户需自备大外管(普
通50 毫升离心管即可)。

三、浓缩实例

实例一:牛小肠碱性磷酸酶
使用上述的缩霸TM 浓缩步骤,如下表所示,不同体积和浓度的牛小肠碱性磷酸酶样的蛋白质质量浓缩均约为6 倍,蛋白定量测定质量回收率平均为90%,而酶活性测定所确定的活性回收率为100%。结果表明,浓缩前后的酶比活性比值约为111%,即缩霸TM 浓缩不但提高了酶的质量浓度,保持了90%的酶蛋白质量回收率,还使酶的比活性提升了约11%。
起始酶样体积
(毫升)
起始酶样浓度
(mg/mL)
浓缩后酶蛋白质
质量回收率(%)
浓缩后酶活性
回收率(%)
浓缩后酶比活性
(%)
0.6 0.02 88 100 114
0.05 90 100 111
0.15 89 100 112
10 0.06 91 100 110
可以设想,蛋白质变性通常是一个它的构象从紧凑状态到松散状态的驰豫过程,而这个过程含有失活但可以逆转复性的中间体。缩霸TM 介质对这个中间体水化分子的快速吸取将导致它的构象紧缩而复性,不但提高了浓缩样的活性成分比例或比活性,也等于纯化了活性构象。值得一提的是,同种构象或高构象纯度十分有利于同序列的蛋白质分子之间的协同相变运动,即有利于用于结构分析的蛋白质的结晶及晶体生长。

实例二:牛血清白蛋白与黄色荧光蛋白
使用0.6 毫升小体积缩霸TM 浓缩体系做6 倍左右液体浓缩,在高、中、低不同初始浓度下,水溶性好的牛血清白蛋白及良好分散性的黄色荧光蛋白可获得90%以上的质量回收率,如下表所示:
初始浓度(mg/mL) 牛血清白蛋白浓缩后回收率(%) 黄色荧光蛋白浓缩后回收率(%)
0.01 93 90
0.10 98 95
0.50 100 100

实例三:组氨酸标记重组蛋白Protein AGL 纯化
大肠杆菌表达的重组蛋白Protein AGL 经过破碎得到20 毫升粗液,再经过5 毫升镍化琼脂糖(产品编号P0103)重力柱纯化后得到20 毫升的咪唑洗脱液。该洗脱样用洗脱液调整体积至24 毫升,分别用2 个大体积缩霸TM 浓缩体系及2 克缩霸TM 介质做6 倍左右的浓缩,每个浓缩体系得到近2 毫升的浓缩液,再用我们的快速离心脱盐柱(产品编号P0201)脱盐,即得到纯化Protein AGL 浓缩液。
我们浓缩及脱盐产品组合实现了Protein AGL 简单、快速(1 小时内)、高蛋白质质量和活性回收率(总回收率80%以上)及低成本的终纯化。对比传统的繁琐(费心费力)、缓慢(至少1 个工作日)、低回收率(成功率和得率均没有保证)和高成本的透析、超滤或层析等脱盐或浓缩方法,我们新的纯化浓缩技术体系具有巨大优势。

实例四:小鼠单抗IgG1 亚型纯化
对比传统的Protein A 琼脂糖介质,我们的Protein AGL 琼脂糖(产品编号P0101)对各类免疫球蛋白及片段具有高亲和力,是适用面广的优质抗体纯化介质。这个优势体现在小鼠单抗IgG1 亚型的纯化上。5 毫升小鼠IgG1 亚型腹水样品经5 毫升PBS 稀释后,装载在5 毫升的Protein AGL 琼脂糖重力柱上;再经过清洗、酸洗脱和中和步骤,得到24 毫升左右的抗体洗脱液;分别再用2 个大体积缩霸TM 浓缩体系及2 克缩霸TM 介质做6 倍左右浓缩,每个浓缩体系得到近2 毫升的浓缩液;最后用我们的快速离心脱盐柱(产品编号P0201)脱盐,即得到纯化的小鼠IgG1 单抗浓缩液。

我们抗体纯化、浓缩及脱盐产品的组合实现了小鼠单抗简单、快速(2 小时内)、高蛋白质质量和活性回收率(总回收率80%以上)及低成本的纯化。对比传统的繁琐(费心费力)、缓慢(至少1 个工作日)、低回收率(成功率和得率均没有保证)和高成本的透析、超滤或层析等脱盐或浓缩方法,我们新的纯化浓缩技术体系具有巨大优势。

实例五:尿液蛋白浓缩
人尿所含的微量蛋白可以经过简单快速的缩霸TM 浓缩能提高它的浓度和可检测性。正常人尿12 毫升混入每毫升2 微克的辣根过氧化物酶作为模式蛋白尿样,用大体积缩霸TM 浓缩体系及2 克缩霸TM 介质做6 倍左右的酶蛋白质量及活性浓缩,酶活性回收率在95%以上。