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蛋白组学前处理试剂盒
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品牌 逸微健华
过期 长期有效
更新 2025-08-12 18:04
 
详细信息
蛋白组学前处理试剂盒
产品概述

目前常规的蛋白质组样品前处理过程存在着诸多问题,如重现性差、方法稳定性不好、灵敏度不高且非常耗时及无法自动化等。针对上述问题,逸微健华推出新一代“All In One Tube”的创新产品,本产品主要是针对微量蛋白(5-100 μg)的处理,即便是没有组学背景的科研人员,也可以快速的制备前处理的样品,可用于后续的质谱分析。

产品组分及储存条件
 
名称 规格 储存条件
Lysis buffer 1.5 ml -20 ℃
Balance buffer 5 ml 4 ℃
Digest buffer 0.5 ml -20 ℃
Stop buffer 1 ml RT
Wash buffer 1 15 ml RT
Wash buffer 2 15 ml RT
Elution buffer 25 ml RT
Loading buffer 5 ml RT
Tip柱 48 T RT

操作流程
 
  1. 裂解
  • 取20 μL的Lysis buffer加入到含有样品的EP管中,震荡混匀;
  • 将含有Lysis buffer的EP管水浴95℃、10 min,然后取出冷却至室温。
  1. 酶解
  • 向冷却至室温的EP管中加入90 μL的Balance buffer;
  • 加入1 μL的Digest buffer后混匀,37 ℃,震荡酶解12-16 h。
  1. 除盐(室温)
  • 向样品中加入10 μL的Stop buffer,涡旋混匀;
② 将样品转入Tip柱中,500 rpm/min,离心3-5min,直到液体全部离心下来,如果液体流速较慢,可以加大转速;
③ 向脱盐柱中加入200 μL的Wash buffer 1(用之前震荡10-20 s),500 rpm/min,离心3-5 min,直到液体全部离心下来;
④ 向脱盐柱中加入200 μL的Wash buffer 500 rpm/min,离心3-5 min,直到液体全部离心下来;
⑤ 将脱盐柱重新放入一个新的EP管中,向脱盐柱中加入200 μL的Elution buffer,500 rpm/min,离心3-5 min,直到液体全部离心下来;
⑥重复步骤⑤,收集两次的洗脱液,冷冻干燥;
⑦加入10 μL的Loading buffer, 剧烈涡匀3 min,离心20,000 g、10 min,取适量样品,即可质谱检测。以HF-X仪器为例,上样0.5-1μg即可。

注意事项和免责说明
本产品仅限于专业人员的科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。