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KHOS-240S细胞ATCC CRL-1545标准细胞株基本信息
| tttt出品公司: | ttttATCC |
|---|---|
| tttt细胞名称: | ttttKHOS-240S细胞, ATCC CRL-1545细胞, KHOS24OS细胞, 人骨肉瘤细胞 |
| tttt细胞又名: | ttttKHOS240S |
| tttt存储人: | ttttJS Rhim |
| tttt种属来源: | tttt人 |
| tttt组织来源: | tttt骨 |
| tttt疾病特征: | tttt骨肉瘤 |
| tttt细胞形态: | tttt上皮细胞样 |
| tttt生长特性: | tttt贴壁生长 |
| tttt培养基: | ttttRPMI1640，90%；FBS，10%。 |
| tttt产品目录号: | ttttCRL-1545 |
| tttt生长条件: | tttt气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, |
| tttt传代方法: | tttt1：2至1：6，每周2次。 |
| tttt冻存条件: | tttt90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 |
| tttt支原体检测: | tttt阴性 |
| tttt安全等级: | tttt1 |
| ttttSTR: | tttt tttttttttAmelogenin: XtttttttttCSF1PO: 12tttttttttD13S317: 12tttttttttD16S539: 10,13tttttttttD5S818: 13tttttttttD7S820: 11,12tttttttttTHO1: 6tttttttttTPOX: 11tttttttttvWA: 18ttt |
| tttt参考文献: | tttt tttttttttttttttYang YH, et al. Reversion of Kirsten sarcoma virus transformed human cells: elimination of the sarcoma virus nucleotide sequences. J. Gen. Virol. 43: 447-451, 1979. PubMed: 225428ttttttttttt tttttttttttCho HY, et al. Revertants of human cells transformed by murine sarcoma virus. Science 194: 951-953, 1976. PubMed: 62397 tttttt ttttttt |
tKHOS-240S细胞ATCC CRL-1545人骨肉瘤细胞接受后处理
1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。
4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。
tKHOS-240S细胞ATCC CRL-1545人骨肉瘤细胞培养操作
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
tKHOS-240S细胞ATCC CRL-1545人骨肉瘤细胞培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和 诺安基因 技术 部 沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联 系，告知细胞的具体情况，以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7.该细胞仅供科研使用。
细胞培养相关试剂
| tttt血清 | tttt细胞培养基 | tttt其他细胞试剂 |
|---|---|---|
| tttt南美血清：Gibco BI Gemini tttt北美血清：ATCC tttt澳洲血清: Gibco ttttES专用血清: ATCC Gibco | ttttEMEM培养基: ATCC ttttDMEM培养基: ATCC Gibco ttttRIPI1640培养基: ATCC Gibco ttttL-15培养基: ATCC ttttF-12K培养基: ATCC ttttDMEM/F12培养基: ATCC tttta-MEM培养基: Gibco ttttIMDM培养基: ATCC tttt tttt | tttt青链霉素双抗: ttttATCC 30-2300 ttttGibco 15140-122 ttttHyclone SV30010 tttt tttt细胞转染试剂: ttttInvitrogen Lipo 2000 ttttInvitrogen Lipo 3000 tttt tttt冻存液 ttttSigma细胞培养级DMSO tttt无血清细胞冻存液 tttt tttt胰酶细胞消化液 ttttATCC 30-2101 ttttGibco 25200-056 ttttHyclone SH30042.01 |