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无血清细胞快速冻存液(-80℃直冻
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品牌 Dowobio
过期 长期有效
更新 2025-08-12 14:37
 
详细信息

成分与安全:

不含血清及动物源成分,化学组成明确,避免外源因子污染(如病毒、支原体)。

含保护性成分,如DMSO,减少冷冻损伤,提高细胞存活率(复苏活率>98%)。

 

保存说明:

保存:4℃保存,一年有效;运输:冰袋(2-8℃)或蓝冰运输。

 

操作便捷性:

1. 无需程序降温:可直接将冻存管置于-80℃冰箱冷冻,省去传统梯度降温步骤。

2. 即用型配方:无需额外配制,简化实验流程。

3. 保存稳定性。

4. 冻存细胞可在-80℃保存1-2年,长期保存建议转移至液氮(>5年)。

5. 冻存液本身在2-8℃ 保存12个月。

 

操作步骤:

细胞冻存

细胞准备

1、选择对数生长期、状态良好的细胞,确保无污染。

2、贴壁细胞:消化成单细胞悬液(推荐含EDTA的胰酶)。

3、悬浮细胞:直接离心(300g,5-10分钟)弃上清。

4、重悬与分装:1) 用预冷的冻存液重悬细胞,调整浓度为1×10⁶~1×10⁷/mL(推荐密度:2-5×10⁶/mL)。

2) 分装至冻存管(每管1-1.5mL),避免室温停留超过10分钟。

5、冷冻保存:1) 直接转移冻存管至-80℃冰箱,无需程序降温盒。

2) 长期保存:24小时后转入液氮罐(气相液氮更佳)。

细胞复苏

快速解冻

1、从液氮或-80℃取出冻存管,37℃水浴轻摇至仅剩微小冰块。

2、稀释与离心:1) 将细胞悬液转移至含预温培养基(体积为冻存液9倍)的离心管,轻柔混匀。

2)离心(300g,5分钟)弃上清,去除残留DMSO。

3、接种培养:用新鲜培养基重悬细胞,接种至培养容器,24小时后更换正常培养基。