背景
多聚组氨酸标签（6xHis标签）和His标签，是从各种表达系统（包括细菌、酵母、植物细胞和哺乳动物细胞系统）中纯化重组蛋白的常用工具。该标签是位于重组蛋白N或C末端的包含六个或更多个连续组氨酸残基。由于这种氨基酸链体积非常小，His标签具有几个独特的特性，包括较少的免疫原性、亲水性以及在天然和变性条件下均能发挥作用的用途广泛性。此外，由于其不会干扰融合蛋白的结构与功能，因此无需从重组蛋白上切割该标签。His标签的纯化原理基于固定化金属离子亲和层析（IMAC）。

固定化金属离子亲和层析（IMAC）是一种快速亲和纯化层析技术，是直接捕获和纯化 带标签重组蛋白的高性价比理想工具。IMAC基于携带his标签的重组蛋白对Ni²⁺或Co²⁺的亲和力从而达到分离目的，而Ni²⁺或Co²⁺则被结合固定到固相基质表面，例如珠状琼脂糖或纯化柱。在pH 7-8时，His标签蛋白将与Ni²⁺或Co²⁺结合。His标签重组蛋白的结合反应受到各种自变量的影响，如pH、温度、盐类型、盐浓度、固定化的金属和配体密度以及蛋白质大小。可通过降低pH梯度、增加咪唑浓度或在缓冲液中加入EDTA螯合剂来洗脱结合的蛋白质。

尽管IMAC是一种非常有效的蛋白纯化技术，但这种技术主要用于传统的亲和层析基质，如琼脂糖树脂或纯化柱。使用这些固体基质进行纯化的过程非常繁琐、耗时，且无法处理体积非常微小的样品，也难以适应自动化系统。因此，Bioclone研发出了一种非常有效的磁珠IMAC分离产品以克服这些困难。