Bioclone 一步法PCR抑制剂清除试剂盒 可快速有效地从DNA样品中去除PCR抑制剂,以获得准确、高质量的PCR结果。该试剂盒使用简单、方便且具有成本效益。
从不同生物样本中提取的DNA模版,通常都会含有各类PCR抑制剂。 PCR抑制剂是一些能抑制聚合酶链式反应(PCR)中DNA扩增的化合物,一般会通过与DNA聚合酶的活性位点直接结合,来影响其发挥其作用,干扰PCR的正常扩增,从而导致降低DNA扩增的敏感性甚至完全失败。因此,在PCR前从DNA模版中去除PCR抑制剂对于所有下游应用至关重要。
PCR抑制剂来源于哪里?
PCR抑制剂可能来自原始样品本身,如存在于各种生物材料(器官、血液、体液等)、环境样品(水、土壤、空气等)和食物(肉、奶、水果、蔬菜、海鲜等)中。此外,在运输、样品处理(例如预浓缩过程)或核酸提取、纯化过程中可能会添加或残留一些抑制物质。下表列出了一些常见的PCR抑制剂种类及来源。
来源 | 抑制剂种类 |
血液、肌肉组织 | 肝素、血红蛋白、免疫球蛋白、蛋白酶、核酸酶、阿昔洛韦、激素、IgG、乳铁蛋白、肌红蛋白、胶原蛋白 |
牛奶 | 蛋白酶,钙离子 |
大便 | 胆汁盐、复合多糖、脂质、尿酸盐 |
植物 | 果胶、多酚、多糖、木聚糖、叶绿素 |
土壤 | 富里酸、腐殖酸、腐殖物质、金属离子、多酚 |
样品制备 | KCl、SDS、二甲苯 |
DNA纯化 | 离液盐、乙醇、异丙醇、苯酚、乙酸钠 |
塑料制品 | 蛋白酶,核酸酶 |
如何去除PCR抑制剂?
目前,常用的几种除抑制剂或降低其影响的方法如下:
1. 稀释含有PCR抑制剂的样品提取物。这种方式非常简单,但DNA模版浓度的降低可能会影响PCR效果。
2. Chelex,例如Chelex1-100和基于苯酚-氯仿的方法。Chelex只能去除一些二价离子,而无法去除其他种类多样的PCR抑制剂。苯酚-氯仿法也只能清除脂质和蛋白质。
3. 柱式色谱法,例如Sephacryl S-400,Sephadex G-200和基于二氧化硅的离心柱或磁珠,可有效去除一些抑制剂,但该过程耗时费力。
上述方法可以去除一些PCR抑制剂,但具有以下局限性:
1. 效率较低、耗时或需要大量手动操作。
2. 操作过程中DNA样品的潜在耗损。
3. 高盐溶液和乙醇可能残留到到洗脱的DNA中。
4. 不适用于高通量处理和自动化设备。
Bioclone公司研发出了一种基于磁珠法的新型高效PCR抑制剂清除试剂盒。
BcMag™ One-Step PCR Inhibitor Removal Kit 是基于负相核酸纯化技术的,一步法DNA纯化试剂盒,可在PCR、RT和其他下游实验之前,从DNA样品中一步去除PCR抑制剂。操作过程非常简单快速:仅需一步,一管,一分钟完成纯化。本试剂盒采用的磁珠是超顺磁性磁珠,并经专有的化学物质进行了修饰。当磁珠与含抑制剂的样品混合时,磁珠会立刻捕获并去除PCR抑制剂,将纯净的DNA保留在溶液中。本款磁珠可以有效去除多种常见的PCR抑制剂,如多酚化合物、腐殖酸/黄腐酸、酸性多糖、单宁、黑色素、肝素、洗涤剂和牛仔布染料,以及二价阳离子(如Ca2+、Mg2+)等。
操作过程:
只需将本款磁珠添加到待纯化的DNA样品中,使用振荡器2000rpm震荡5分钟 或使用移液器反复吹吸20-25次,就可以捕获并清除杂质。再将样品容器放置于磁力架约30s将磁珠沉淀到底部,上清液中即含纯净DNA片段。
不同于传统的结合-清洗-洗脱过程,此过程中不使用任何有机溶剂,盐类或者EDTA等物质,而且接近100%回收样品。本款磁珠可在10分钟以内,同时处理96个样品,不需要昂贵的实验仪器,仅需实验常用涡旋设备,性价比非常高。
具体请参见产品资料所附说明书。
特点和优势:
* 操作简单:不用移液,一步,一管
* 超快纯化过程:一分钟可以完成纯化,处理96个样品手动时间不超过10分钟
* 超高的纯度和回收率:DNA片段(> 50bp)回收率> 90%
* 广泛的清除种类:多酚类化合物,腐殖质酸,酸性多糖,单宁酸,黑色素,去垢剂,牛仔布染料,二价阳离子如 Ca2+, Mg2+等
* 无需纯化柱、过滤器,无需费力的反复移液吹吸混合,不使用酒精
* 高通量:可兼容多种不同的自动化液体处理系统
运输和储存:
常温运输,货到后4℃保存,可储存12个月。不可冷冻!
样品预处理系列 (询价有优惠) | |||
货号 | 名称 | 规格 | 价格 |
AH101 | BcMag™ 一步法DNA/RNA纯化试剂盒 | 1 ml | 2250 |
AH102 | BcMag™ 一步法DNA/RNA纯化试剂盒 | 5 ml | 6750 |
AI101 | BcMag™ 一步法一代测序纯化试剂盒 | 1 ml | 2250 |
AI102 | BcMag™ 一步法一代测序纯化试剂盒 | 5 ml | 6750 |
AK101 | BcMag™ 一步法荧光标记物清除试剂盒 | 1 ml | 2250 |
AK102 | BcMag™ 一步法荧光标记物清除试剂盒 | 5 ml | 10350 |
AO101 | BcMag™ 一步法NGS纯化试剂盒 | 1 ml | 2250 |
AO102 | BcMag™ 一步法NGS纯化试剂盒 | 5 ml | 10350 |
AP101 | BcMag™ 一步法PCR纯化试剂盒 | 1 ml | 2250 |
AP102 | BcMag™ 一步法PCR纯化试剂盒 | 5 ml | 10350 |
AU101 | BcMag™ 一步法RNA清除试剂盒 | 1 ml | 2250 |
AU102 | BcMag™ 一步法RNA清除试剂盒 | 3 ml | 5250 |
AV101 | BcMag™ 一步法DNA/RNA清除试剂盒 | 1 ml | 2250 |
AV102 | BcMag™ 一步法DNA/RNA清除试剂盒 | 3 ml | 5250 |
AW101 | BcMag™ 一步法单链DNA清除试剂盒 | 1 ml | 2250 |
AW102 | BcMag™ 一步法单链DNA清除试剂盒 | 3 ml | 5250 |
AX101 | BcMag™ 一步法PCR抑制剂清除试剂盒 | 1 ml | 2250 |
AX102 | BcMag™ 一步法PCR抑制剂清除试剂盒 | 5 ml | 10350 |
AY101 | BcMag™ 高纯度质粒提取试剂盒 | 5 ml | 4125 |
AY102 | BcMag™ 高纯度质粒提取试剂盒 | 10 ml | 7875 |
CA101 | BcMag™ 快速 Oligo-DNA偶联试剂盒 | 100 mg Beads Kit | 5400 |
CA102 | BcMag™ 快速 Oligo-DNA偶联试剂盒 | 200 mg Beads Kit | 9750 |
CA103 | BcMag™ RNA-DNA偶联试剂盒 | 100 mg Beads Kit | 5400 |
CA104 | BcMag™ RNA-DNA偶联试剂盒 | 200 mg Beads Kit | 9750 |
BA101 | BcMag™ 一步法脂质清除试剂盒 | 1 ml | 2250 |
BA102 | BcMag™ 一步法脂质清除试剂盒 | 5 ml | 10350 |
BB101 | BcMag™ 一步法脱蛋白清除试剂盒 | 1 ml | 2250 |
BB102 | BcMag™ 一步法脱蛋白清除试剂盒 | 5 ml | 10350 |
BC101 | BcMag™ 一步法SDS清除试剂盒 | 1 ml | 2250 |
BC102 | BcMag™ 一步法SDS清除试剂盒 | 5 ml | 10350 |
BE101 | BcMag™ 快速白蛋白清除试剂盒 | 25 preps Kit | 3750 |
BE102 | BcMag™ 快速白蛋白清除试剂盒 | 100 preps Kit | 9750 |
BF101 | BcMag™ 快速 HSA-IgG清除试剂盒 | 25 preps Kit | 3750 |
BF102 | BcMag™ 快速 HSA-IgG清除试剂盒 | 100 preps Kit | 9750 |
BG101 | BcMag™ 一步法染料清除试剂盒 | 1 ml | 2250 |
BG102 | BcMag™ 一步法染料清除试剂盒 | 5 ml | 10350 |
BH101 | BcMag™ 固定化TCEP二硫化物还原试剂盒 | 100 mg | 3750 |
BH102 | BcMag™ 固定化TCEP二硫化物还原试剂盒 | 500 mg | 6750 |
BJ101 | BcMag™ 一步法生物素清除磁珠 | 1 ml | 2250 |
BJ102 | BcMag™ 一步法生物素清除磁珠 | 5 ml | 10350 |
MKE101 | BcMag™ 快速内毒素清除试剂盒 | 2ml 磁珠(50mg/ml) 10ml 10x再生缓冲液 | 5250 |
MKE102 | BcMag™ 快速内毒素清除磁珠 | 5ml 磁珠 (50mg/ml) | 7425 |
MKE103 | 10x 再生缓冲液 | 20 ml | 2535 |
FQ101 | BcMag™ EDTA金属离子清除试剂盒 | 150 mg | 4125 |
FQ102 | BcMag™ EDTA金属离子清除试剂盒 | 300 mg | 7875 |
BI101 | BcMag™ EGTA金属离子清除试剂盒 | 150 mg | 4125 |
BI102 | BcMag™ EGTA金属离子清除试剂盒 | 300 mg | 7875 |