T8 RNA聚合酶简介
T8 RNA聚合酶是一种经过改良的RNA聚合酶,专为体外转录(IVT)设计,具有低dsRNA生成、高加帽效率和耐热性等特点。以下是其在核酸合成试剂分类中的详细简介:
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1. 产品特性**
- **低dsRNA生成**:T8 RNA聚合酶通过基因工程改造,能够显著减少双链RNA(dsRNA)的生成,从而降低RNA的免疫原性。
- **高加帽效率**:支持共转录加帽反应,合成的mRNA具有更高的加帽率。
- **耐热性**:具有约52℃的耐热性,适合高温条件下的RNA合成。
- **高纯度**:生产过程中严格控制RNase、宿主蛋白和外源DNA残留。
2. 应用领域**
- **mRNA合成**:用于合成高质量的mRNA,适用于疫苗、基因治疗和蛋白质替代疗法。
- **RNA药物开发**:支持RNA药物的工业化生产,符合GMP规范。
- **基础研究**:用于制备非临床试验的医药品原药。
- **RNA探针制备**:用于合成高特异性的RNA探针、siRNA前体等。
3. 保存与运输**
- **保存条件**:在-20℃下保存,有效期为2年。
- **运输条件**:冰袋或干冰运输,确保低温。
#### **4. 使用方法**
- **反应体系**:通常包含10×Transcription Buffer(含Mg²⁺、DTT等成分)、NTP(如ATP、GTP、CTP、UTP)和模板DNA。
- **反应条件**:在50-52℃下进行反应,反应时间根据RNA长度和产量调整。
- **注意事项**:建议使用RNase-free的试剂和耗材,避免核酸降解。
5. 产品优势**
- **低免疫原性**:通过减少dsRNA的生成,降低了RNA的免疫原性,适合对免疫原性有严格要求的应用。
- **高温稳定性**:相比传统T7 RNA聚合酶,T8 RNA聚合酶在高温下表现出更高的稳定性。
- **多功能性**:支持多种RNA合成需求,包括mRNA、siRNA、gRNA等。