根据您的描述,24765-1 是 PolySciences 公司生产的一款 聚乙烯亚胺(Polyethylenimine, PEI) 转染试剂。PEI 是一种阳离子聚合物,广泛用于将 DNA 或 RNA 导入哺乳动物细胞中,尤其是在大规模蛋白质表达和悬浮细胞转染中表现出色。
以下是关于 PolySciences 24765-1 产品的详细介绍:
产品概述
产品名称 | Polyethylenimine (PEI) Transfection Reagent |
产品编号 | 24765-1 |
化学名称 | 聚乙烯亚胺(分支型) |
分子量 | 通常为 25 kDa(具体分子量需参考产品说明书) |
外观 | 白色或淡黄色粉末 |
溶解性 | 可溶于水,形成透明溶液 |
储存条件 | 干燥、避光,室温或 4°C 保存 |
产品特点
高效转染:
适用于多种哺乳动物细胞系,尤其是悬浮细胞(如 HEK293、CHO 细胞)。
能够实现高转染效率和高蛋白表达水平。
低成本:
相比于商业化脂质体转染试剂,PEI 的成本更低,适合大规模实验。
低细胞毒性:
在优化条件下,PEI 对细胞的毒性较低,能够维持较高的细胞存活率。
稳定性:
PEI-DNA 复合物稳定性高,适合长时间转染实验。
应用领域
蛋白质表达:用于大规模重组蛋白生产,尤其是在 HEK293 和 CHO 细胞中。
基因功能研究:用于过表达或敲低特定基因,研究其功能。
病毒包装:用于慢病毒或腺病毒包装系统中的质粒转染。
使用方法
以下是使用 24765-1 进行转染的一般步骤(具体操作需参考产品说明书或文献):
1. 试剂准备
① 将 PEI 粉末溶解于无菌水中,配制成 1 mg/mL 的储存液。
② 用 0.22 µm 滤器过滤除菌,分装后保存于 -20°C。
2. DNA-PEI 复合物制备
① 将 DNA 与 PEI 以一定比例(通常为 1:2 或 1:3,DNA:PEI 质量比)混合于无血清培养基中。
② 室温孵育 15-30 分钟,形成 DNA-PEI 复合物。
3. 细胞转染
① 将 DNA-PEI 复合物均匀加入细胞培养物中,轻轻混匀。
② 在 37°C、5% CO₂ 培养箱中继续培养。
4. 换液与检测
① 转染 6-24 小时后更换新鲜培养基。
② 根据实验目的,在 24-72 小时后检测转染效率或蛋白表达水平。
优化建议
DNA 与 PEI 比例:
不同细胞类型和实验目的可能需要优化 DNA 与 PEI 的比例。通常建议从 1:2 或 1:3(DNA:PEI ,质量比)开始尝试。
细胞密度:
确保细胞在转染时处于对数生长期,密度适中(通常为 70-90% 融合度)。
培养条件:
悬浮细胞(如 HEK293 或 CHO 细胞)需要调整细胞密度和培养体积,以达到最佳转染效果。
注意事项
无菌操作:
转染过程中需严格保持无菌操作,避免污染。
毒性控制:
PEI 的用量过高可能导致细胞毒性,需根据细胞类型调整用量。
储存与稳定性:
PEI 储存液在 -20°C 可长期保存,避免反复冻融。
技术参数
分子量:25 kDa(典型值,具体以产品说明书为准)
pH 值:7.0-9.0(1 mg/mL 水溶液)
溶解性:易溶于水,形成透明溶液
储存温度:室温或 4°C(干燥避光)
参考文献
如果需要更详细的使用方法或优化条件,可以参考 PolySciences 提供的产品说明书,或查阅相关文献(如 HEK293 或 CHO 细胞转染的经典方法)。
总结
PolySciences 24765-1 是一款高效、低成本的 PEI 转染试剂,特别适合大规模蛋白质表达和悬浮细胞转染。通过优化实验条件,用户可以在多种哺乳动物细胞中实现高转染效率和高蛋白表达水平。如需更多信息,建议联系 柏莱源生物 官方网站或联系其技术支持团队。