qPCR（实时荧光定量PCR）的原理‌是通过在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的变化实时监测PCR反应的进程，并通过标准曲线对未知模板进行定量分析。其基本原理包括荧光信号监测、Ct值计算和特异性检测。荧光信号监测是指在PCR反应体系中加入荧光基团，通过测量荧光信号的强度来实时监测PCR反应的进程。Ct值计算是指荧光强度大于最小检测水平时的PCR循环数，它是实时PCR的基本参数，用于获得准确且重现性好的数据。特异性检测则通过熔解曲线分析，特异性好的PCR扩增产物在熔解曲线上呈现为单峰图。‌12

‌qPCR的应用‌非常广泛，包括但不限于以下几个方面：

1. ‌基因表达调控研究‌：通过定量检测不同条件下基因的表达量，进一步研究基因表达的调控机制。
2. ‌疾病诊断‌：检测病原微生物或疾病相关基因的表达量，为疾病的诊断和治疗提供辅助依据。例如，在肿瘤诊断中，qPCR可以检测肿瘤相关基因的异常表达，从而帮助早期发现和诊断肿瘤。
3. ‌药物筛选‌：通过检测药物对基因表达的调控效应，筛选药物对特定基因的影响。