细胞凋亡（程序性死亡）伴随特定生化标志物的变化，主要检测靶点包括：

1. ​​磷脂酰丝氨酸（PS）外翻​​：凋亡早期，细胞膜内侧的PS翻转至外侧，可被Annexin V蛋白特异性结合。
2. ​​DNA断裂​​：凋亡晚期，DNA片段化产生3'-OH末端，可通过TUNEL法标记。 
3. ​​Caspase蛋白酶活化​​：Caspase-3/7等酶激活是凋亡关键信号，可通过底物水解检测活性。
4. ​​线粒体膜电位（ΔΨm）崩溃​​：早期凋亡时线粒体膜电位下降，JC-1染料可示踪此变化。

代表性产品与技术特点​​

• ​​Annexin V系列​​：
  • ​​荧光组合​​：FITC/PI（常规）、APC/7-AAD（避免绿色荧光干扰）、PE/7-AAD（适用于GFP转染细胞） 
  • ​​关键优势​​：可区分活细胞（Annexin V⁻/PI⁻）、早期凋亡（Annexin V⁺/PI⁻）、晚期凋亡/坏死（Annexin V⁺/PI⁺） 
• ​​TUNEL试剂盒​​：
  • 适用于组织切片原位检测，需预先制备石蜡或冷冻切片 
• ​​Hoechst 33342/PI双染法​​：
  • 替代方案：Hoechst 33342标记固缩染色质（凋亡细胞蓝色荧光增强），PI标记死细胞（红色荧光），适用于快速筛查

​​试剂盒选择的关键因素​​

1. ​​样本类型​​：
   • ​​悬浮/贴壁细胞​​：所有试剂盒均适用。
   • ​​组织样本​​：优先选TUNEL（需切片）或Caspase检测（需匀浆裂解） 
2. ​​仪器配置​​：
   • 流式细胞仪：兼容Annexin V、TUNEL、JC-1。
   • 无流式设备：可选Caspase比色法（酶标仪）或TUNEL显微镜法 
3. ​​细胞自发荧光干扰​​：
   • 若细胞表达GFP，避免使用FITC标记试剂，改用Annexin V-PE/APC 
4. ​​凋亡阶段需求​​：
   • 早期凋亡：JC-1或Annexin V（PI阴性） 
   • 晚期凋亡：TUNEL或Annexin V/PI双阳性