产品介绍：EZBioscience® 2× Color SYBR Green qPCR Master Mix (ROX1 plus) 使用经过热启动激活技术保护的特殊修饰 Taq DNA 聚合酶和优化的 qPCR 缓冲系统来执行基于 SYBR Green I 的实时定量 PCR (qPCR) .该混合物添加了惰性红色染料。 EZBioscience® Color Reverse Transcription Kit（货号：A0010C、A0010CG 或 A0010CGQ）包含惰性蓝色染料以避免移液错误。在 qPCR 反应中将 cDNA 和其他成分混合在一起会使溶液变成紫色。这在移液时提供了视觉帮助，并降低了反应设置期间移液错误的风险，尤其是在使用白色反应容器时。染料不会影响 qPCR 反应的特异性或敏感性。该混合物以 2 倍反应浓度制备，可直接用于高模板和低模板 qPCR，具有高灵敏度、特异性和可靠性。

Introduction

The EZBioscience^® 2× Color SYBR Green qPCR Master Mix (ROX1 plus) uses a specially modified Taq DNA polymerase protected by a hot-start activation technique, and optimized qPCR buffer system to perform SYBR Green I based Real-time quantitative PCR (qPCR). This Mix is supplemented with an inert red dye. And the EZBioscience^® Color Reverse Transcription Kit (Cat. No.: A0010C, A0010CG or A0010CGQ) contains an inert blue dye to avoid of pipetting errors. Mixing cDNAs and other components together in a qPCR reaction turns the solution into purple. This provides a visual aid when pipetting and decreases the risk of pipetting errors during reaction setup, especially when using white reaction vessels. The dyes do not affect the specificity or sensitivity of qPCR reactions. The mix is prepared at 2× reaction concentration, and can be directly used on both high and low-template qPCR with high sensitivity, specificity and reliability.
qPCR，即荧光定量PCR是利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增中每一个循环扩增产物量的变化，并进行定量分析。我们通常做的常规PCR只是关注PCR最后扩增的产物，通过电泳进行判断，产物是否发生扩增，即我们的模板中是否存在我们待检测的目标基因。而qPCR是期望对PCR反应过程的每一步都能进行监测，而不只是关注PCR最终的扩增结果。qPCR原理是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物总量的方法,应用于对PCR进程进行实时检测。
注意事项：
在我们进行qPCR实验时，需要根据所用试剂盒说明书加入适量的起始核酸模板，过多的模板可能提高污染物含量，大大降低 PCR 效率，过少的模板可能会降低检测灵敏性和重复性。
除了要保证模板的质量外，引物探针的设计和稳定性同样至关重要。当我们根据检测靶标设计特异性引物和探针时，除了要考虑片段长度，Tm值，碱基组成等基本要点外，还需格外注意引物，探针自身不能形成复杂的二级结构，上下游引物内部，引物探针之间不能出现结合的现象，因为这些都可能影响引物探针与目标基因的结合，进而影响最终的扩增效率。
当我们准备好模板和引物探针，接下来需要面对的问题就是：哪款扩增试剂适合我们的实验所需呢？

qPCR扩增曲线一般分成四个阶段：基线期、指数期、线性期和平台期。

基线期

PCR起始时，刚开始前几个循环的荧光信号还没有发生变化，接近一条直线，将其称之为基线，一般是3-15个循环。在基线期内，扩增的荧光信号被背景荧光信号所掩盖，无法判断PCR产物量的变化。

指数期

扩增的荧光信号高于背景荧光信号，扩增曲线起峰，开始进入指数期。在指数期内，每个循环积聚的产物准确加倍（假定100%反应效率）。该阶段的PCR反应具有高度特异性和精确度。因为所有试剂均充足，反应的动力学推动反应有利于扩增子加倍，所以产物出现指数级扩增。只有在这个阶段，Cq值与初始模板量的对数之间存在线性关系，所以在此阶段进行定量分析最合适。

线性期（高变异性）

随着PCR反应体系各成分的消耗，其中的一种或者多种成分限制反应，导致反应开始减缓，并且每个循环的PCR产物不再加倍，该阶段不再是指数级扩增。

平台期

反应停止，不再产生更多产物，并且如果放置时间够长，PCR产物将开始降解。因为每个样品具有不同的反应动力学，所以每支试管或每个反应将在不同的时间点进入平台期，最终的产物含量也各不相同。

 由于线性期和平台期的扩增产物已不再呈指数级的增加，PCR的产物量与初始模板量之间没有线性关系，所以也不能通过这两个阶段的PCR产物量计算出初始模板量。想要知道初始模板量的多少，还要依赖指数期的Cq值进行计算。

产品成分：