Cellular influenza plaque test kit
流感病毒噬斑实验套装
ECAK-4
价格：1400
DMEM两乘无酚红 500ML 价格300元
增强型贴壁试剂-自产 1ml 用法(10-100乘）价格300元
TPCK-Trypsin  1ml(2mg/ml)  用法1：1000-2000 无菌即用  230元
胰蛋白酶 来源于牛胰腺
Trypsin from bovine pancreas
TPCK Treated, essentially salt-free, lyophilized powder, ≥10,000 BAEE units/mg protein
0.4低熔点琼脂糖  50ml 价格750
 
产品优势：TPCK-Trypsin加入到细胞中，细胞容易漂，后面影响实验效果
增强型贴壁试剂，替代明胶、多聚赖氨酸、粘粘蛋白、等优势很大，操作简单。效果突出，已有工业案例（工业案例在产品说明附件中），科研用户文章也有发表。案例细胞（含血清方案的半悬半贴细胞用户都有应用，原代心肌、神经元类与粘连蛋白比较实验都有实验室做过，效果很突出。

原代、单细胞克隆筛选，成球成干培养、耐药株筛选，等优势较大很大，操作简单，各种疑问环节，可来信告知，我们给出简单操作理由及统计十年经验观点供老师参考。
本套方案有用在高表达杂交瘤筛选，单克隆表达细胞株筛选，原代细胞筛选、稳转耐药株筛选、单细胞筛选、细胞筛选实验的用户，可来信沟通（标注：细胞噬斑筛选沟通）。
建议全部进口试剂耗材。细胞来源明确。两年以上培养经验。国内实验室做原代细胞建系正当时（我有用户原代食管癌细胞构建养了已经两年时间了，我们的观点是以您实验室名明的细胞系已经非常容易了，试剂丰富，技术优势、比美国60年前做的细胞系会容易很多，后面ATCC保种的细胞，国内实验室会越来越多）
北京用户我们可上门沟通，随时

配套推荐与统计交流
单细胞琼脂筛选打孔器：准确安全取样，无菌独立包装。孔径：3mm(其他孔径需求来信咨询）--价格192元
单细胞成份滋养补给方法：目的应用不一样，方法上有差别，难点是统计后会出现更优理论与方法的较好的办法。问题的积累应该能有更优的方法。
单细胞消化方法技巧可以沟通，这块我们开始统计。目前推荐低浓度胰酶，其他方法各有利弊，细胞贴壁不牢，是否含血清及消化试剂对细胞后续质量也会有很大影响。
关于诱导方法后期我们还统计：那种诱导方案更优（Mitomycin C γ射线 电脉冲 化学固） 是我们后面统计的目的，有兴趣老师来信告知需要哪些数据。我们统计过程中会问道。统计后告知。

细胞贴壁与悬浮反向陪养驯化（含血清方案）:目前解决免疫悬浮细胞贴壁与团聚问题已有相关技术储备与解决方案。贴壁陪养驯化成悬浮陪养，已有解决思路（来源部分需求是将离体组织陪养成细胞，后续会对贴壁细胞系含血清驯化成悬浮陪养）

团聚：主要是免疫悬浮细胞系、胰导胰腺类细胞系，神经类细胞细胞、干细胞成球。免疫细胞目前解决思路是利用上清，临床应用陪养老师也认可的上清回输利用有利于解决团聚。胰腺类胰导类，通过统计问题，消化步骤较关键（胰酶对这类细胞损伤较大，后期会做些消化步骤优化解决这类细胞统计后并公布）。干细胞类成球建议：通过我司这套试剂筛选出集落细胞团。加我司常年统计细胞系一些经验，大团的活性会没有中团细胞活性高，后面要有老师接种动物模型可做统计（或GIBCO-PrestoBlue检测试剂盒是测健康状况的）后面要有老师做这块，我们可与成瘤后效果一起统计并给出确切统计数据。

贴壁程度高中低：各类需求不一，我们还准备在贴壁陪养中，找到各类贴壁需求解决方法。欢迎老师提出需求目的。目前统计U型底，V型底及相关可行促贴壁试剂统计与应用。
U型底推荐应用：目前在原代与成干应用较多。也是单克隆应用开发重点，欢迎相关讨论

欢迎路过老师留下您的问题。我们统计后会公布统计结果。

20220902:二倍体培养体系已经有比较稳妥可行的的培养基，mrc5   wi-38 。比较稳妥取决与这类细胞培养过程中常年问题统计。MDCK反向驯化（贴壁太牢，胰酶消化过程中对细胞损伤并不适合反向驯化）独家秘笈。
主要要点：1、细胞贴壁要好，细胞贴壁不好，细胞容易死亡脱落。2、琼脂糖一定是大品牌低熔琼脂糖。3、细胞密度要稍高一点，密度低了不易形成噬斑。4、琼脂温度要低，37度左右。5、培养基要37度温育。6、琼脂糖与培养基混匀过程轻柔，避免产生过多气泡。
我们一般65度花开低熔点琼脂糖，放37水浴锅冷却，手感温度不高后，迅速轻柔与培养基混匀，然后加到6孔板即可，放4度冰箱冷却10min，倒置培养即可。
做噬斑要求细胞贴壁好，细胞密度要高一些
一般大品牌低熔点琼脂糖，37度短时间不会凝固
sigma原装好些,但不要分装

用我们的套装更没问题


20240415：噬斑工业应用案例参考： 有时候不是分离不到病毒，是细胞维持培养时间不够，特别是难分离，新的病毒，热点应用等，从零到一是重中之重。细胞维持培养是关键，经五年腺病毒、溶瘤病毒，细胞种子库级别试剂，细胞工厂应用等相关技术储备冗余工业试剂提供商应用特点，我们促贴壁起到关键作用。
案例细胞：LMH,维持培养第十天出现噬斑，用户已完成单克隆保种，有相关需求用户要深入讨论难点，建议试剂耗材，厂家型号，培养特点，目的要求，告知详情，我们们给出参考建议，有国外疫苗生产商用户的商家，我们可送试用及解决方案。也可做第三方验证。细胞工厂含血清方案为基础。

 

20240624

20240624工业案例应用一：禽类共生病毒的分离应用：腺，豆、圆环的单种纯化分离，理论方法，预实验都比较理想，更多案例应用还在技术储备中，与各位老师合作讨论难点痛点，北京实验室可参与课题讨论，就难点痛点问题，我们做些统计先，（该方案参考核心附件噬斑十日出图） 国内建系实验室，生长时间过长的，也可考虑单克隆或慢培养两种技术方案，难消化细胞建议从源头考虑重新构建（这类简易解决方法参考，培养皿传代前加层血清可试试），难点都可通过类似问题细工简单解决方案验证，例如：难消化，细工方案通过提高组织活性，可行性高，操作简单，后面单克隆，稳转株，冻存复苏等，都是基于可行性后，把建系难点痛点先行验证可行方案，在运用在建系上。细胞系种子库更新用户，来信告知实验室名称索取POTOCOL,重复试验后建议留克隆后生长全图，我们给出细胞状态评价，通过准株多少判断细胞质量评价参考，种子库更新，生产用细胞，重要实验总是不出结果，通过准株多少意义非常值得重视，单克隆案例图中右下角那个不增值的，单克隆图片种这种细胞太多，也是重复总不出理想结果的一个参考因素， 蛋白互作用对细胞维持培养要求高用户，可把问题先讨论后，细工给些参考建议。单细胞研究需细胞质量提升需求，我们是建系目的，长期培养质量可能会满足您需求。 国内血清生产厂家，能固定原料，成本较高的厂商，工业应用我们可参与筛出工业用细胞株，建系等合作， 20240630

MDCK反向驯化（贴壁太牢，胰酶消化过程中对细胞损伤并不适合反向驯化）更新补充
经消化统计与进展公布讨论，
单细胞、肝原代、类器官、巨噬原代、系：传代后一代难消化（离体处理步骤，离体活性）系常见消化不下来，文献习惯，结合自己常年储备统计，给出两点参考。
难消化建议办法：培养皿传代前加层血清，加一层天然物胶质稠度隔离，会好很多。
常见巨噬很多老师用细胞挂，因我们后面有长期培养与建系目的，超量培养，维持培养，细胞产物生产需更高质量细胞提高产物产量，挂后细胞损伤大（近年有高浓度胰酶消化后吹打损伤细胞文献，这里不阐述）有相关开发产品厂家，我们都可讨论与共享技术部分与共同验证（肝，胰岛胰腺已开始合作实验室建系共同验证）
需细胞活性更高，建系目的，类器官（先建系，在规模培养，先二维，在三维成球）同道中人，共享提高组织到细胞的细胞质量，无外力（化学、机械）影响，合作实验验证，也可通过类似问题，验证细工方案可行性，统一理念重要。

提升种子库质量简易方法(适合国内建系增殖速度与质量提升，无难点，附件图新手第二遍成功），单克隆，慢培养（精筛，促筛）都是简单可行方案，珍贵株推荐细工冻存复苏，优化胰酶等试剂与方法，各类难点痛点都可预实验验证。

20250123

刻石见真身，理枝寒梅翘

十日噬斑成功案例一月后，14日的噬斑图（这两项都是工业用户案例）。原代，难转染细胞，病毒感染建系新解方法思考讨论。正常细胞原代，系，免疫类，难转染统一特性，免疫保护，虽然主流公司这方面转染试剂生产公司已成熟，国内实验室拿到原理核心，理解核心，应该还得几年后，细工在难转染试剂，细胞方面一只在统计相关问题及研发自有技术，也暂时在高滴度病毒上，原代、系在维持培养这两项上下些功夫，两个噬斑案例，给原代建系目的用户做个技术备份组，全病毒液组分离出单病毒，多一份参考。原代，免疫类难转染给出一组超长时间维持培养，增加蛋白与细胞间维持培养互作用，感染后的上清产物，在进行科研研究或生产上游开发做一份技术储备。附件时14日噬斑及对照组图片。

合作海外技术人员，有兴趣参与的可兼职我司销售或技术支持，预实验先行（实验中问题可讨论），可将资料翻译成英文，细工生物是国内技术研发型公司，在国内各类细胞培养中问题统计，十几年心得是，海量问题恰恰比国外公司多一层对问题的理解与更多的技术储备，也是我司提出自动化培养中-冗余试剂设计对抗不问题性，在自动化培养中，试剂与技术部份深耕。
细工通用培养基已开始验证，两种以上细胞，实体瘤+免疫细胞共培养更多数据可讨论培养中问题。