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mRNA转染试剂 / FectinMore™ mRNA -X
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品牌 乔默生物货号CM002-1.5T
过期 长期有效
更新 2025-08-12 19:18
 
详细信息

FectinMore™ mRNA-Xpert转染试剂是专门设计用于将mRNA转入哺乳动物细胞,具有极小的细胞毒性。通过将mRNA直接递送到细胞质,它绕过了转录调控,实现了即时表达。这种方法还避免了基因整合的风险,从而最大限度地减少了与质粒DNA相关的突变的可能性。

操作步骤 (依据上表以24孔板为例)

1. 准备待转染细胞:按照贴壁细胞5×10^4 /孔、悬浮细胞1.5-2.5×10^4 /孔的密度接种于24孔板中,37 ℃培养16-20小时,细胞汇合度达到70%左右可进行转染操作。

2. 转染前30分钟,将待转细胞更换新鲜无血清或有血清培养基。更换的培养基需预先平衡至室温或37 ℃。

3. 准备FectinMore™/mRNA复合物:将0.5μg mRNA溶于25μL无血清培养基中混匀;将1.5μL FectinMore ™加入另外25μL无血清培养基中混匀。室温5分钟后,将后者加入前者中混匀,得到的50μL 复合物室温孵育10-15分钟。

4. 转染:将上述FectinMore™/mRNA复合物加入每孔细胞(无血清或有血清细胞培养基450μL),复合物占总体积的1/10,轻柔摇匀。37℃孵育6-24小时。移除培养基,进行显像/分析转染细胞或添加新鲜培养基继续培养。

 

注意事项:

1) mRNA纯度建议A260/A280=1.9-2.0。

2) 转染时使用的培养基推荐使用Gibco™ Opti-MEM™ I Reduced-Serum Medium或Gibco™ OptiPRO™ SFM培养基。

3) FectinMore™/mRNA复合物混匀操作需充分。