T7体外转录RNA的合成 ——In Vitro HiScript T7 RNA Synthesis Kit

产品概述  EnzyValley^® In Vitro HiScript T7 RNA Synthesis Kit是经分子进化的T7 RNA Polymerase和优化的反应体系组合得到的试剂盒。本试剂盒是以四种rNTP为底物，利用含有T7启动子的DNA模板，从模板DNA T7启动子下游开始合成与DNA模板中反义链互补的RNA，简单快速地获得大量的RNA分子，如mRNA、lncRNA、shRNA。合成的RNA可用于诸如RNA结构与功能研究、RNA酶保护、探针杂交、RNAi、显微注射及体外翻译等多方面的下游应用。同时转录过程中可在底物中加入修饰的核苷酸，制备生物素或染料标记的RNA。预计1 μg的模板投入量可以产生150-200 μg的RNA。为方便客户对转录合成得到的RNA进行纯化，此试剂盒还提供了用于纯化的配套试剂。  
产品内容

组分	T317A	T317B
T7 Enzyme Mix	40 μL	200 μL
5× T7 Reaction Mix	80 μL	400 μL
DNase Ⅰ（1 U/μL）	20 μL	100 μL
rNTP（25 mM）	120 μL	600 μL
Purification Reagent A	200 μL	1 mL
Purification Reagent B	40 μL	200 μL
Control DNA Template	20 μL	100 μL

 

产品优势
转录效率高：可以转录合成大量的RNA分子，如mRNA等
简便：方便对合成的RNA分子纯化
高产量：产量高达150-200 μg 

实验案例
1.  体外转录RNA 先将含T7启动子的质粒模板线性化处理，后以线性化完成的质粒作为DNA模板进行体外转录，反应结束后将RNA产物纯化，并通过电泳检测，检测结果如上图。
  2.  优异的转录效率   带有T7启动子的不同目标长度的DNA转录成RNA。目标片段长度标于电泳图上方。
  应用范围 合成单链RNA；合成高特异性RNA探针；合成siRNA前体；制作RNA剪接反应（RNA Splicing）的前体；以帽类似物（Cap analog）为引物，制作Capped mRNA