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| 名称 | 货号 | 规格 | 货期 |
| 动物ChainFree® Flag标签免疫共沉淀试剂盒 | FI8801 | 12次/24次 | 现货 |
| 动物ChainFree® HA标签免疫共沉淀试剂盒 | FI8806 | 12次/24次 | 现货 |
| 动物ChainFree® Myc标签免疫共沉淀试剂盒 | FI8807 | 12次/24次 | 现货 |
| 动物ChainFree® GFP标签免疫共沉淀试剂盒 | FI8808 | 12次/24次 | 现货 |
| 动物ChainFree® mCherry标签免疫共沉淀试剂盒 | FI8809 | 12次/24次 | 现货 |
| 植物ChainFree® Flag标签免疫共沉淀试剂盒 | FI8811 | 12次/24次 | 现货 |
| 植物ChainFree® HA标签免疫共沉淀试剂盒 | FI8816 | 12次/24次 | 现货 |
| 植物ChainFree® Myc标签免疫共沉淀试剂盒 | FI8817 | 12次/24次 | 现货 |
| 植物ChainFree® GFP标签免疫共沉淀试剂盒 | FI8818 | 12次/24次 | 现货 |
| 植物ChainFree® mCherry标签免疫共沉淀试剂盒 | FI8819 | 12次/24次 | 现货 |
ChainFree® 系列标签抗体免疫共沉淀试剂盒简介
DNA重组技术使目标蛋白带上特定标签，表达的融合蛋白再采用标签抗体来检测，为科学研究带来了极大便利。常见的蛋白标签包括Flag、HA、Myc、V5等，这些标签分子量小，对融合蛋白的活性和细胞内定位几乎没有影响。
针对不同样本的需求，辉骏生物开发了分别针对植物和动物样本的5款ChainFree®标签抗体免疫共沉淀试剂盒：
| 产品名称 | 识别的标签序列 | 磁珠偶联抗体 |
| ChainFree® Anti-Flag CoIP试剂盒 | DYKDDDDK | 优化并重组表达的无轻、重链的Flag抗体 |
| ChainFree® Anti-HA CoIP试剂盒 | YPYDVPDYA | 优化并重组表达的无轻、重链的HA抗体 |
| ChainFree® Anti-Myc CoIP试剂盒 | EQKLISEEDL | 优化并重组表达的无轻、重链的Myc抗体 |
| ChainFree® Anti-GFP CoIP试剂盒 | GFP或EGFP绿色荧光蛋白 | 优化并重组表达的无轻、重链的GFP抗体 |
| ChainFree® Anti-mCherry CoIP试剂盒 | mCherry红色荧光蛋白 | 优化并重组表达的无轻、重链的mCherry抗体 |
实验前先将Flag标签、HA标签或GFP标签等与目标蛋白在样本中融合表达。裂解样本后，将Anti-Flag磁珠（或Anti-HA磁珠、Anti-Myc磁珠等）加入样本中，标签抗体与目标融合蛋白及其结合蛋白形成复合体，去除未结合的蛋白后，可以采用多种方法洗脱蛋白质。分离的蛋白产物既可以用Western blot检测已知蛋白，也可以用质谱（LC-MS/MS）鉴定未知蛋白。
免疫共沉淀CoIP试剂盒的应用方向
蛋白-蛋白间的相互作用是蛋白质发挥生物学功能的主要模式，蛋白质会通过结合不同的伙伴来行驶不同的功能，形成复杂的信号转导网络。CO-IP试剂盒采用Flag抗体磁珠、HA抗体磁珠、Myc抗体磁珠、GFP抗体磁珠或mCherry抗体磁珠捕获样本中天然结合的Flag融合蛋白、HA融合蛋白、Myc融合蛋白、GFP融合蛋白或mCherry融合蛋白，以及它们的互作蛋白，不需要购买诱饵蛋白的IP级别抗体，只需要在细胞或组织中表达融合flag标签的诱饵蛋白，即可以利用标签抗体完成内源性Co-IP实验。以下列举了可应用COIP试剂盒的几个研究方向：
1. 病毒、细菌等病原体侵染宿主细胞的机制；
2. 酶和底物的作用机制；
3. 天然状态蛋白调控复合体的研究。
ChainFree®系列CoIP试剂盒-辉骏生物产品优势
1. 无抗体轻重链污染：IP复合物无论采用非变性洗脱还是变性洗脱，均不会出现抗体的轻、重链污染问题。
2. 亲和力强：低nM级别亲和力，轻松应对低拷贝基因，或难转染细胞系。
3. 特异性强：抗体磁珠通过了20株以上的空白细胞系检测，不易产生非特异吸附。
4. 结合量高：每10 µL抗体磁珠可结合约10~15 µg重组蛋白。
5. 兼容性好：无论标签在诱饵蛋白的N端或C端，都可以识别。
6. 稳定性好：通过了45℃高温测试。
辉骏生物ChainFree®标签抗体磁珠与其他同类产品对比图
Western-Blot结果显示：辉骏生物的ChainFree® 磁珠对诱饵蛋白的亲和力强，IP效果优于sigma产品，远高于国产同类磁珠效果，并且不会产生抗体轻重链污染。
辉骏生物ChainFree®标签抗体磁珠稳定性测试图
Western-Blot结果显示：ChainFree® 磁珠在45℃条件下放置7天，稳定性几乎不受影响。
ChainFree®系列：Flag免疫共沉淀试剂盒组分
| 试剂名称 | 体积（12 Tests） | 体积（24 Tests） | 保存条件 |
| ChainFree® Anti-Flag/HA/Myc/GFP/mCherry磁珠 | 250 μL | 500 μL | 4 ℃ |
| 裂解缓冲液 | 7 mL | 14 mL | 4 ℃ |
| 漂洗液 | 25 mL | 50 mL | 4 ℃ |
| 洗脱缓冲液 | 650 μL | 1.3 mL | -20 ℃ |
| 蛋白酶抑制剂 | 190 μL | 380 μL | -20 ℃ |
Flag/HA/Myc/GFP/mCherry标签免疫共沉淀试剂盒使用流程简述
1. 裂解样本；
2. 样本裂解液与Flag磁珠（或HA磁珠、V5磁珠）孵育；
3. 漂洗、洗脱得到目标蛋白及其互作蛋白复合物。
Anti-Flag CoIP试剂盒使用案例
Co-IP western-blot结果图
Flag免疫共沉淀（flag co-ip）试剂盒—客户文章
 | 1. Li H.B. et al: The plant ESCRT component FREE1 shuttles to the nucleus to attenuate abscisic acid signaling. Nature Plants. 2019，IF=17.352. |