FNV-MERS-abEN 假病毒产品说明书
【产品名称】
通用名称：FNV-MERS-abEN假病毒
【产品规格】
货 号：FNV2575
规 格：1 mL/支
【产品介绍】
本品通过化学合成的方法获取中东呼吸综合症冠状病毒（MERS）的ORF1 a、ORF1 b和UP-E 基因部分基因序列以及E 基因和N 基因的全序列，并克隆构建至逆转录病毒载体，在293T 细胞内进行假病毒的制备，通过通过层析柱纯化和超速离心浓缩。所获得的假病毒为逆转病毒外膜包裹ORF1 a、ORF1b UP-E 基因部分序列以及E 基因和N 基因的全序列。可以用于病毒RNA 核酸提取实验和QPCR 检测实验的阳性对照产品。
【产品元件结构】
【产品序列信息】
见附录
【主要成分】
葡萄糖、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠和FNV-MERS-abEN假病毒。
【存储条件及有效期】
冻存于-20℃以下，有效期6个月。
【产品用量】
推荐使用量：50μL-100μL/次。不同实验室使用不同的核酸提取试剂盒进行实验操作，所得实验结果会存在一定的差异。建议各实验室根据实验情况做优化调整。
【使用方法】
1. 假病毒融化：将假病毒从-20°C 冰箱中取出，置于冰上融化或4℃条件下自然融化，待其完全融化后可进行相关的实验操作；
2. 假病毒灭活（可选项）：在生物安全柜中吸取当次实验所需量的假病毒于EP管中，置于56℃条件下灭活30min；
3. 假病毒核酸提取（材料自备），本产品可以使用膜吸附或磁珠吸附的试剂盒进行假病毒RNA的抽提。
4. QPCR检测（材料自备）：假病毒RNA经RT-PCR成cDNA后进行QPCR定量检测实验。
5. 补充说明，本产品制备过程中可能存在少量质粒DNA 残留，对于纯度要求比较高的实验，可在RNA 抽提时使用本公司DNase-DEPC-H2O(Cat.NO.FBE002）进行RNA 溶解洗脱。之后加入终浓度5mM EDTA,75℃条件下10min，进行DNase酶灭活（可选项）。
【注意事项】
1. 冻融会导致假病毒的稳定性降低，从而影响核酸抽提的效果及QPCR 检测结果，使用时应避免反复冻融；
2. 病毒灭活处理可能会导致RNA 的降解，请根据实际实验需求合理选择。
3. 如果需要对本产品进行稀释处理，可以使用磷酸盐缓冲液（PBS）或者生理盐水(0.9% NaCL)进行稀释；
4. 如果使用时本品不慎溅到眼睛、皮肤或其他身体部位请立即使用大量清水冲洗；
5. 使用本品所产生的实验废弃物需要通过高压灭菌处理后按照医疗废弃物处理要求进行处理。
【附录】
1. MERS-abEN
ACTACTTGTTTGAGACTATTCCCACACAGTTGTTCCCACTCTTA
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AGCGCACTCGCACCCGTCCAAGTGTTCAGCCTGGTCCAATGATT
GATGTTAACACTGATTAG
*涵盖了WHO官方公布的检测引物，
ORF1a:CCACTACTCCCATTTCGTCAG/CAGTATGTGTAGTGCGCATATAA
GCA;ORF1b:TCGATGTTGAGGGTGCTCAT/ACACCAGTTGAAAATCCTAA
TTG; up-E CAACGCGCGATTCAGTT/GCCTCTACACGGGACCCATA