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EZRecombinase™ Mix (LR酶/BP酶)
单价 $650.00对比
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发货 Congo
品牌 GeneCopoeia产地广州
过期 长期有效
更新 2025-08-12 17:54
 
详细信息

◎ EZRecombinase™ BP II Enzyme Mix New!(Cat.No. ER013/ER014) 预混版
BP II Enzyme Mix对比BP Mix,BP酶和反应buffer经优化形成预混溶液,更加稳定,可以保存在-20℃。
◎ EZRecombinase™ BP Mix (Cat.No. ER003) 非预混版
GeneCopoeia 提供的 EZRecombinase™ BP Mix 可以使 DNA 片段高效、快速的在相兼容的载体间转换。EZRecombinase™ BP mix 催化含有 attB 位点的 DNA 片段与含有 attP 位点的载体进行重组反应,生成新的 EZShuttle™ 或 Gateway® Entry clone。


产品优势

  • 高活性酶;
  • 与现有的 Gateway® 克隆技术完全兼容;
  • 2种形式可选:预混形式和非预混形式;

EZShuttle™ BP重组技术
EZRecombinase™ BP mix 包含 Int 和 IHF,催化含有 attB 位点的 DNA 片段与含有 attP 位点的载体进行体外重组反应,生成新的 EZShuttle™ 或 Gateway® Entry clone。
将 attB-PCR产物或 Expression clone 与 pShuttle™ 载体混合,然后加入 EZRecombinase™ BP mix,室温(25℃)反应 1 小时后用于转化 E.coli 感受态细胞(图2)。


图1. 一步法将含有 attB 位点的 DNA 片段转移到 pShuttle™ 载体或 Gateway® pDONR ™ 载体。
◎ EZRecombinase™ LR II Enzyme Mix New! (Cat.No. ER011/ER012) 预混版
LR II Enzyme Mix对比LR Mix,LR酶和反应buffer经优化形成预混溶液,更加稳定,可以保存在-20℃。


产品优势

  • 高活性酶,EZRecombinase™ LR Mix 活性比 Gateway® LR Clonase™ 的活性高;
  • 与现有的 Gateway® 克隆技术完全兼容;
  • 预混形式,更方便使用

EZShuttle™ LR重组技术

在 EZRecombinase™ LR Mix 作用下,EZShuttle™ LR 重组技术将 DNA 片段从含有 attL 位点的 EZShuttle™ 或Gateway® Entry clone转移到含有 attR 位点的 pEZ™ 表达载体或 Gatewayt® pDEST 载体。 EZRecombinase™ LR Mix 包含 Int(λ Integrase)、IHF(E.coli Integration Host Factor)和 Xis(Excisionase)。
将 EZShuttle™ 或 Gateway® Entry clone 与 pEZ™ 表达载体混合,然后加入 EZRecombinase™ LR mix,室温(25℃)反应 1 小时后用于转化 E.coli 感受态细胞(图3)。


图2. 一步法从EZShuttle™或 Gateway® Entry clone 转移DNA 片段到pEZ™表达载体或Gatewayt® pDEST载体。

GeneCopoeia 提供的 EZShuttle™ 重组克隆体系应用 E.coli 和 λ 噬菌体特异位点的重组酶促体系使 DNA 片段在载体间相互转换;其原理与 Gateway® 克隆技术相同。EZShuttle™ 重组克隆体系主要包含以下产品:
1. EZRecombinase™ Mixes:催化 attL x attR 和 attB x attP 重组反应。
2. pEZ™ 表达载体: 主要用于构建即用型表达克隆。
3. EZShuttle™ Gateway® PLUS 穿梭克隆:GeneCopeia 提供约 35,000 种人和小鼠的 EZShuttle™ Gateway® PLUS 穿梭克隆。

EZShuttle™ 重组克隆体系与 Gateway® 克隆技术完全兼容,如表1所示。


表1. GeneCopoeia’s EZShuttle™ 重组克隆体系(左列)与 Gateway® 克隆技术完全兼容。

产品优势
由重组酶、表达载体和已验证 ORF 序列的穿梭克隆组成的一个完整的重组克隆体系;
EZRecombinase™ LR Mix 和 EZRecombinase™ BP Mix 的活性高;
提供带有不同筛选标记和标签的 pEZ™ 表达载体,这些载体可用于基因克隆、基因编辑、蛋白质纯化和基因功能分析;

产品应用

  • 构建即用型表达克隆:使穿梭克隆或其它 DNA 片段插入到表达载体。
  • 蛋白质纯化:使目的基因在一个或多个系统中表达,然后用于蛋白质纯化、形成结晶、抗体的制备、DNA 结合化验等。
  • 启动子交换:克隆目的基因到带有不同启动子的载体。
  • 启动子分析:利用报告基因测试不同启动子的功能,例如:荧光素酶。
  • 基因标签:表达不带标签或带有不同融合标签的目的基因,例如: 6XHis、Flag®、GFP 等;可用于免疫共沉淀或亚细胞      定位等。

EZShuttle™ 重组克隆体系原理
GeneCopoeia 提供的 EZShuttle™ 重组克隆体系应用 E.coli 和 λ 噬菌体特异位点的重组酶促体系使 DNA 片段在载体间相互转换;其原理与 Gateway® 克隆技术相同。

备注: Gateway® 是 Life Technologies 的注册商标。