产品简介

    本产品提供了一种简单、快速、可靠的方法，用于从多种来源的动物细胞分离纯化高质量的总RNA，无需使用苯酚、氯仿、异丙醇和DEPC水等有毒物质。纯化后的总RNA适用于多种下游应用，包括：RT-PCR、RT-qPCR等。

产品组分

注:*1. Wash Buffer首次使用前，请加入52 ml的无水乙醇并充分混匀，加好混匀后可在瓶身做好标记。

保存条件

本产品中的DNA Removing Spin Columns需避光保存在4°C，其余所有组分保存在室温，可稳定保存12个月。过期日期详见产品标签中有效期信息。

产品特点

1.  简单快速：可在 ~ 8分钟内获取高质量的总RNA。

2.  安全无毒：无需苯酚、氯仿、异丙醇和DEPC水等有毒试剂，无需乙醇沉淀。

3.  无基因组残留：使用独特的DNA清除柱高效去除残留的gDNA。

4.  纯度高：提取的RNA可用于多种下游实验，如RT-PCR、RT-qPCR等。

实验流程

注意事项

1.  Wash Buffer使用前须加入52 ml的无水乙醇并充分混匀（Wash Buffer与无水乙醇的体积比为1:4），加好混匀后可在瓶身做好标记。

2.  85%乙醇的配制方法：按照无水乙醇:灭过菌的ddH2O = 85:15的体积比例进行配制。

3.  建议把Elution Buffer分装为3 ~ 4份，以减小污染的概率。

4.  RNA提取须在室温进行，提取过程中不可置于冰上。

5.  建议用6孔板或35 mm培养皿培养细胞，培养至细胞密度达到80%以上时进行RNA提取，不建议用100 mm培养皿培养的细胞直接裂解提取RNA，否则可能导致细胞裂解不充分或离心柱堵塞或导致基因组残留。

6.  细胞充分裂解以后，如果不想立即进行RNA提取，可将裂解产物转移至离心管中，冻存于-80°C冰箱中；提取RNA时，需要解冻并恢复到室温才可进行后续的实验步骤。

7.  洗脱RNA时，应将洗脱液加到离心柱中央的膜上（如果洗脱液加到侧壁上，会导致RNA没有被溶解而使产量大大减少），同时注意避免移液器枪尖将膜刺破。

代表性实验结果

1. 使用本产品从A549细胞中提取的RNA用Nanodrop检测的结果

由图可见，本产品提取的RNA具有很好的纯度和较高的浓度。从A549细胞中提取RNA用琼脂糖凝胶电泳检测的结果（30 μl Elution Buffer洗脱/溶解RNA，取5 μl上样）。M：250bp DNA Ladder，Lanes 1为TRIzol (Invitrogen)方法提取的RNA；Lanes 2为本产品提取的RNA。由图可知：本产品提取RNA的得率明显高于TRIzol方法。

相关详细信息，请查看产品说明书。