细胞介绍

该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。

细胞特性

1） 来源：乳腺癌

2） 形态：上皮细胞样 贴壁生长

3） 含量：>1x106 细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5) 用途：仅供科研使用。

细胞筛选

该细胞为稳定转染Luc的细胞，随细胞传代次数的增加，其Luc荧光强度会逐渐减弱。若实验要求需要维持荧光强度，可以加入嘌呤霉素进行再次筛选。

建议收到细胞后至少传3代，冻存留种后再进行筛选。

初次进行细胞筛选时，建议加入终浓度为1ug/ml嘌呤霉素的完全培养基维持培养，若无细胞漂浮或者漂浮较少，即可更换为含2ug/ml嘌呤霉素的完全培养基继续筛选，以此类推，至最高药物浓度为5ug/ml。若筛选过程中，漂浮细胞大于60%，则停止筛选，换成正常培养基培养，至细胞密度约80%，可继续加入同浓度嘌呤霉素进行筛选。当加入5ug/ml嘌呤霉素时细胞正常增殖，可停止筛选，用不含药完全培养基正常培养。

一． 培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备L15（推荐iCell-0009）培养基；优质胎牛血清 10%；双抗，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，100%；该细胞培养不能通入CO2，如果没有条件准备空气气相100%的培养箱的，可以采用不透气密封盖的T25培养瓶来培养，培养过程中每天将细胞拿出培养箱换1-2次空气。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%FBS，10%DMSO，现用现配。

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