B6CBA-Tg(HDexon1)62Gpb/3J
品系货号：006494
RRID:IMSR_JAX:006494
通用名称：B6CBA-R6/2 (CAG 120 +/- 5)
此转基因小鼠品系表现出进行性神经系统疾病表型，可模拟人亨廷顿舞蹈症 (Huntington's disease, HD) 的多种特征，包括舞蹈症样运动、不自主刻板运动、震颤和癫痫发作，以及异常发声等非运动障碍。整个病程期间会出现尿频以及体重减轻和肌肉减少。神经系统疾病的发病涉及神经元核内包涵体，其中包含亨廷顿蛋白和泛素蛋白。此转基因品系携带5' 端包含约 120 ± 5 个 CAG 重复序列扩展的人HD基因。
重点提示：
杰克森实验室筛选/选择 Pde6b 基因位点野生型（即不携带 CBA/J 来源的 Pde6brd1 等位基因）进行转基因种群繁育。但由于此品系的维持方法是在每一代将 R6/2 转基因 Pde6b+/+ 动物与 B6CBAF1 杂交系交配，因此部分后代为 Pde6brd1 的杂合子。此外，这些动物的后代中的其他 C57BL/6J 或 CBA/J 特异性突变（例如，NntC57BL/6J 等）在基因型方面均有可能是杂合子、纯合子或野生型。
2007 年 1 月：品系名称和表型变更。·更多信息请参见“品系建立”。

品系亮点
转基因
捐赠者
Gillian Bates - 伦敦大学学院神经科学研究所

品系详情
此转基因品系所携带的人 HD 基因 5' 端包含近 120 ± 5 个 CAG 重复序列扩展。该转基因广泛表达。此转基因小鼠品系表现出进行性神经系统疾病表型，可模拟 HD 的多种特征，包括舞蹈症样运动、不自主刻板运动、震颤和癫痫发作，以及异常发声等非运动障碍。这些小鼠在整个病程期间会出现尿频以及体重减轻和肌肉减少。此外，这些小鼠会产生包含亨廷顿蛋白和泛素蛋白的神经元核内包涵体 (Neuronal Intranuclear Inclusion, NII)。上述 NII 现已在人 HD 患者体内发现，这一点过去未得到确认。据报道，HD 症状的发病年龄介于 9 ~ 11 周之间。此小鼠通常称为“R6/2”品系。转基因小鼠在 12 周龄时出现高血糖症，并伴随胰岛素水平的相应降低。
胰岛 β 细胞内的亨廷顿蛋白包涵体最早出现在 7 周龄时，在 12 周龄时 95% 以上的 β 细胞均已出现包涵体。在 12 周龄时，胰岛 α 和 δ 细胞（分别为 24% 和 6% 的细胞）也出现了一些包涵体。在 12 周龄时，胰岛变为低渗状态，并且 β 细胞数量大幅减少。β 细胞内几乎没有胰岛素分泌囊泡。
(Bjorkquvist M., et al.2005)

CAG 重复序列监测：
R6/2 转基因小鼠的 CAG 重复序列数量受生殖细胞/体细胞不稳定性的影响，可能增加或减少。为确保品系货号 002810 和 006494 小鼠的 CAG 区域保持稳定，杰克森实验室测定了每只转基因携带动物的 CAG 重复序列区域长度。更多信息请参见下方的“R6/2 转基因小鼠品系基本信息”。

Pde6b 等位基因监测：
杰克森实验室筛选/选择 Pde6b 基因位点野生型（即不携带 CBA/J 来源的 Pde6brd1 等位基因）进行转基因种群繁育。但由于此品系的维持方法是在每一代将 R6/2 转基因 Pde6b+/+ 动物与 B6CBAF1 杂交系交配，因此部分后代为 Pde6brd1 的杂合子。此外，这些动物的后代中的其他 C57BL/6J 或 CBA/J 特异性突变（例如，NntC57BL/6J 等）在基因型方面均有可能是杂合子、纯合子或野生型。

HDexon1 转基因在基因组中的位置和拷贝数：
HDexon1 转基因的作用方式是单个拷贝插入。序列分析结果表明，其插入点位于小鼠 4 号染色体上预测基因 Gm12695 的内含子中 (chr4:96,409,585-96,414,930 [assembly NCBI 37/mus musuculus 9])，并且该转基因的侧翼是两段不包含编码 DNA 完整 1 号外显子的重排序列 (Cowin et al.2011 PLoS ONE 6(12):e28409)。此外，一个革兰氏阳性细菌序列片段（可能来自克隆载体污染）插入到能够驱动完整拷贝表达的 HTT 启动子的上游。转基因插入片段还导致整合位点附近的小鼠染色体 DNA 出现 5.4 kbp 的缺失 (Chiang et al.2012 Nat Genet.44(4):390-7)。截至 2017 年 1 月，预测基因 Gm12695 的功能未知。该基因在小鼠大脑中的表达水平通常可以忽略。转基因插入片段（在 Gm12695 转录的反义方向）让 Gm12695 的部分片段（8-11 号外显子）在皮层中的表达增加 - 并且现已证明此转录本在与 R6/2 模型相关的广泛的差异表达基因网（包括调控突触传递、细胞信号转导和转录）中大量表达 (Jacobsen et al.2017 Sci Rep.7:41120)。

此品系小鼠在运输时贴有 JAXTagTM 耳标。

R6/2 转基因小鼠品系的基本信息：
此 R6/2 转基因小鼠品系的转基因表达的是在5‘端携带有不同数量 CAG 重复序列扩展的人 HTT。
此 CAG 重复序列数量受生殖细胞/体细胞不稳定性的影响，可能增加或减少。R6/2 动物的表型随着 CAG 重复序列长度而显著改变，并且与人类中的观察结果类似，在此转基因通过父系遗传传递时，R6/2 转基因小鼠中 CAG 重复序列扩展的发生率更高。有趣的是，在 R6/2 小鼠中，拷贝-表型关系不呈线性，而且较长的 CAG 重复序列也未必导致发病提前和更严重的表型。遗传背景可能也会导致疾病严重程度/进展出现差异。
如果使用的是 CAG 重复序列长度不稳定的品系，则强烈建议定量全部实验动物的 CAG 重复序列数 - 所有实验组中的全部动物均应携带类似长度的 CAG 重复序列。应采用高分辨率方法测定 HD 小鼠 CAG 重复序列的长度，而琼脂糖凝胶电泳类分析的分辨率通常不足以准确测定 CAG 重复序列数。

品系建立
此转基因是约 1 kb 的人 HD 基因，包含启动子区域，带有120 ±  5 个 CAG 重复序列的1号外显子。此品系在原始文献中的名称为 R6-2 品系。
2006 年秋季，B6CBA-Tg(HDexon1)62Gpb/1J 种群的转基因出现 CAG 重复序列单元数减少（约 100-105 个 CAG 重复序列），并且伴随着预期的神经系统疾病表型严重程度降低和发病延迟。储备库于 2006 到 2007 年之间的冬天复苏了 HDexon1 品系的冷冻胚胎。胚胎复苏品系的 CAG 重复序列数约为 160 ± 10，HD 症状的发病时间为 9 - 11 周龄，与此品系最初报道的时间相同。
此胚胎复苏品系继续作为 B6CBA-Tg(HDexon1)62Gpb/1J（品系货号 002810）使用。表型发生变化的品系（之前品系货号为 002810）现命名为 B6CBA-Tg(HDexon1)62Gpb/3J（品系货号 006494），并且 CAG 重复序列数维持在 120 ± 5 个重复序列单元。

CAG 重复序列监测：
R6/2 转基因小鼠的 CAG 重复序列数量受生殖细胞/体细胞不稳定性的影响，可能增加或减少。为确保品系货号 002810 和 006494 小鼠的 CAG 区域保持稳定，杰克森实验室测定了每只转基因携带动物的 CAG 重复序列区域长度。更多信息请参见下方“品系详情”中的“R6/2 转基因小鼠品系基本信息”。

Pde6b 等位基因监测：
杰克森实验室筛选/选择 Pde6b 基因位点野生型（即不携带 CBA/J 来源的 Pde6brd1 等位基因）进行转基因种群繁育。但由于此品系的维持方法是在每一代将 R6/2 转基因 Pde6b+/+ 动物与 B6CBAF1 杂交系交配，因此部分后代为 Pde6brd1 的杂合子。此外，这些动物的后代中的其他 C57BL/6J 或 CBA/J 特异性突变（例如，NntC57BL/6J 等）在基因型方面均有可能是杂合子、纯合子或野生型。

HDexon1 转基因在基因组中的位置和拷贝数：
HDexon1 转基因的作用方式是单个拷贝插入。序列分析结果表明，其插入点位于小鼠 4 号染色体上预测基因 Gm12695 的内含子中 (chr4:96,409,585-96,414,930 [assembly NCBI 37/mus musuculus 9])，并且该转基因的侧翼是两段不包含编码 DNA 完整 1 号外显子的重排序列 (Cowin et al.2011 PLoS ONE 6(12):e28409)。此外，一个革兰氏阳性细菌序列片段（可能来自克隆载体污染）插入到能够驱动完整拷贝表达的 HTT 启动子的上游。转基因插入片段还导致整合位点附近的小鼠染色体 DNA 出现 5.4 kbp 的缺失 (Chiang et al.2012 Nat Genet.44(4):390-7)。截至 2017 年 1 月，预测基因 Gm12695 的功能未知。该基因在小鼠大脑中的表达水平通常可以忽略。转基因插入片段（在 Gm12695 转录的反义方向）让 Gm12695 的部分片段（8-11 号外显子）在皮层中的表达增加 - 并且现已证明此转录本在与 R6/2 模型相关的广泛的差异表达基因网（包括调控突触传递、细胞信号转导和转录）中大量表达 (Jacobsen et al.2017 Sci Rep.7:41120)。

育种须知
起初，人们认为半合雌性小鼠无生育能力。但杰克森实验室的实验证实，半合雌性小鼠有生育能力，只不过因发病而无法照顾其幼崽。半合雌性小鼠的卵巢功能正常。[2022 年 4 月]

半合雄性小鼠的繁育窗口为 3-4 周，因此交配计划中应设置多只雌性小鼠。尽管半合雄性小鼠的原始描述为大约仅半数具有生育能力，但杰克森实验室内的实验证实，半合雄性小鼠在这 3-4 周的繁育窗口期间具有正常的生育力 [2022 年 4 月]。

交配方案为 B6CBAF1 雌性小鼠 X 半合 HD62 雄性小鼠，理想设置是 两雌一雄（2 只 B6CBAF1 雌性小鼠和 1 只半合雄性小鼠）。目前此品系的维持方法是卵巢移植半合雌性小鼠 x B6CBAF1/J 雄性小鼠。两种交配方案可供客户选择，其中更推荐卵巢移植半合雌性小鼠 x B6CBAF1/J 交配计划。

CAG 重复序列监测：
R6/2 转基因小鼠的 CAG 重复序列数量受生殖细胞/体细胞不稳定性的影响，可能增加或减少。为确保品系货号 002810 和 006494 小鼠的 CAG 区域保持稳定，杰克森实验室测定了每只转基因携带动物的 CAG 重复序列区域长度。更多信息请参见“品系详情”中的“R6/2 转基因小鼠品系基本信息”。

Pde6b 等位基因监测：
杰克森实验室筛选/选择 Pde6b 基因位点野生型（即不携带 CBA/J 来源的 Pde6brd1 等位基因）进行转基因种群繁育。
但由于此品系的维持方法是在每一代将 R6/2 转基因 Pde6b+/+ 动物与 B6CBAF1 杂交系交配，因此部分后代为 Pde6brd1 的杂合子。此外，这些动物的后代中的其他 C57BL/6J 或 CBA/J 特异性突变（例如，NntC57BL/6J 等）在基因型方面均有可能是杂合子、纯合子或野生型。

预期通过育种获得的被毛颜色为黑色和野鼠色。