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无甘油Phi29 DNA聚合酶（HC）
无甘油Phi29 DNA聚合酶(HC)是一种高合成能力、高保真度的酶，具有强大的链置换活性，可实现稳定的恒温DNA扩增。它专为需要精准高效DNA合成的应用而设计，是全基因组扩增、单细胞基因组学和分子诊断的理想选择——无论采用液态还是冻干试剂盒。
主要产品特点
产品描述
Meridian 无甘油 Phi29 DNA 聚合酶 (HC) (MDX240) 是一种高持续性酶，具有强大的链置换活性，能够高效地从低拷贝样本进行恒温 DNA 扩增。其 3′→5′ 外切酶（校对）活性可确保高保真度扩增，而其卓越的持续性则使其能够合成超长、高分子量的 DNA 产物。
这款高浓度、无甘油的配方针对多重置换扩增 (MDA) 和滚环扩增 (RCA) 进行了优化，有助于全基因组扩增、单细胞基因组学和分子诊断。该酶强大的链置换活性确保即使在低拷贝模板下也能保持稳定的性能。
不含甘油的 Phi29 DNA 聚合酶 (HC) 不含甘油，并且经过优化以提供强大的性能，使其成为液体和冻干形式诊断检测开发的理想选择。
要点：
- 实现高精度、稳定的等温 DNA 扩增
- 用最少的模板产生超长、高分子量的 DNA
- 适用于全基因组扩增（WGA）、单细胞基因组学和分子诊断
- 不含甘油的配方提高了诊断应用的稳定性
滚环扩增 (RCA) 是一种高效的等温扩增方法，利用环状 DNA 模板和引物合成超长单链 DNA，生成长串联 DNA 链。链置换 DNA 聚合酶（Phi29 DNA 聚合酶）持续合成 DNA，围绕环状模板移动，并产生原始序列的多个串联重复序列。该过程可产生高分子量 DNA，使 RCA 成为基因组研究、分子诊断、病原体检测和单细胞分析等应用的理想选择。
反应配制
| 试剂名称 | 体积 | 最终浓度 |
|---|---|---|
| Lyo-Ready Phi29 DNA Pol 反应缓冲液，5x | 10 微升 | 1 x |
| 抗外切引物 (100 μM) | 0.5 微升 | 1 μM |
| 100 mM dNTP 混合物 | 0.5 微升 | 1mM |
| dNTP 混合物，100 mM | 0.2 微升 | 1mM |
| 环状DNA模板 | X μL | |
| 无甘油Phi29 DNA聚合酶（HC），100 U/μL | 0.1 微升 | 10 U/反应 |
| 100 mM MgCl2 | 2.5 μL | 5 mM |
| 水 | 最多 50 μL |
常见问题解答：无甘油 Phi29 DNA 聚合酶 (HC)
Phi29 聚合酶的推荐温度是多少？
Phi29 聚合酶的推荐温度为 30°C。
反应需要含有DTT吗？
DTT 可以提高 Phi29 聚合酶的活性，因此建议对于经过多次冻融循环的反应缓冲液，通过添加额外的 DTT 来补充 DTT。
如何使 Phi29 DNA 聚合酶失活？
Phi29 DNA 聚合酶可在 65°C 下加热 10 分钟灭活。
使用什么类型的引物？
Phi29 DNA 聚合酶具有强大的 3′-5′ 外切酶活性，可降解未受保护的引物。因此，强烈建议使用 3′ 端至少含有两个硫代磷酸酯核苷酸间键的引物。
为什么不含甘油？
不含甘油的酶制剂与环境温度稳定过程兼容，例如冻干或风干