Meridian迈迪安近日全新推出了一系列无甘油NGS建库分子酶，可以实现冻干常温储运，简化运输物流，不仅减少包装材料和运输成本，而且还能减少冷链储运造成相关的碳排放，符合迈迪安坚持为体外诊断开拓可持续性创新原料的战略。

 

该系列酶以高浓度形式，满足了POC设备对微型化的要求。通过使用更小的反应体积量，最大化上样量的同时，确保性能的一致性，提高检测林敏度。迈迪安的新型无甘油高浓度酶进一步助力NGS研发人员设计下一代 POC NGS检测。

 

除此以外，迈迪安还可以为特定的 NGS 应用定制冻干试剂，根据需要提供冻干球定制服务。

Meridian生命科学部门总裁Lourdes Weltzien博士说：“在 Meridian，产品创新背后的驱动力是我们对理解和减轻客户挑战的坚定承诺。随着我们全新无甘油NGS酶产品系列的推出，消除客户在处理NGS应用关键原材料时遇到的物流障碍，旨在助力IVD企业能够在全球范围内提升和拓宽他们的NGS能力。”

 

总结来说，此次迈迪安推出的全新NGS酶产品主要优势包括：

• 不含甘油，可兼容冻干，在常温下储运 

• 高浓度，适用于POC便携式NGS测序设备 

• 最大限度地增加上样量，提高灵敏度

   

该系列分子酶覆盖了NGS建库的各个阶段，具体包括：

 

T4多聚核苷酸激酶

T4多聚核苷酸激酶（T4 Polynucleotide Kinase），简称T4 PNK，是一种多聚核苷酸5'羟基激酶，可以催化ATP的γ位磷酸基团向单链或双链DNA、RNA、寡核苷酸或带有3'磷酸基团的单核苷酸的5'羟基转移。其他NTP也可产生相同的反应：5'-OH + NTP → 5'-P + NDP。

 

上述的磷酸化反应是可逆的。当缺失ATP并且存在ADP的情况下，T4 PNK可以显示出5'磷酸酯酶的活性，催化单链或双链DNA、RNA、寡核苷酸或带有3'磷酸基团的单核苷酸的5'磷酸基团向ADP的转移形成ATP。其他NTP也可产生相同的反应：5'-P + NDP → 5'-OH + NTP(最适pH为6.4左右)。

 

当ATP和ADP都适量存在时，T4 PNK可以催化单链或双链DNA、RNA、寡核苷酸或带有3'磷酸基团的单核苷酸的5'磷酸基团和ATP的γ位磷酸基团之间的交换反应。其他NTP也可产生相同的反应：5'-P + NTP + NDP→5'-P + NDP + NTP。

 

T4 PNK同时具有3'磷酸酯酶活性，可催化3'磷酸化的多聚核苷酸的去磷酸化：3'-P → 3'-OH + Pi(最适pH为5.9左右)。T4 PNK的激酶活性在C-末端附近，而磷酸酯酶活性在N-末端附近。

T4 PNK主要用于：

1. 使寡核苷酸、DNA或RNA的5'端磷酸化，确保后续连接反应顺利进行

2. 催化3'磷酸化的单核苷酸的5'磷酸化，使该单核苷酸可以和DNA或RNA的3'末端连接

3. 去除3'端磷酸基团

 

T4 PNK的最*优反应温度是37°C或室温。75℃加热10分钟或加入EDTA可使其失活。金属离子螯合剂、磷酸盐、铵根离子、大于50mM的KCl和NaCl均可显著抑制其酶活性。

 

迈迪安的MDX206无甘油T4 PNK以10U/μL提供，并提供优化的5x反应缓冲液，缓冲液中含有冻干所需的辅料，提供出色、稳定的性能。