Agilent Seahorse-XFe分析仪试剂指南

Agilent Seahorse消耗品专用于Seahorse-XFe分析仪，可确保结果的可靠性和一致性。SeahorseXF试剂盒和试剂通过为线粒体呼吸、糖酵解和脂肪酸氧化的测量提供预校准、预测试过的试剂，可简化XF实验的运行。

    特定配方、无缓冲的培养基更简单易用，只需简单加入实验所需的补充物即可。Seahorse XFe FluxPak 还提供正确配比的微孔板和校准液，简化您的 XF 实验和耗材订购。

     

    Seahorse XF 微孔板专为 XFe 分析仪而开发，可使探针板测量的灵敏度达到最佳，并提供来自活细胞、分离线粒体、胰岛和细胞球体的重要功能代谢数据。

 

 

主要功能及优势：

优化的“即开即用”形式可简化实验程序并降低分析复杂性

化合物直接溶解于分析培养基，无需 DMSO 或其他有机溶剂

一次性使用，减少浪费并避免储存用过的化合物

批量生产试剂盒经过严格的化学和生物学测试以保证质量，减少源于实验失败的成本

Seahorse XF 实时 ATP 速率测定试剂盒（103592-100，103591-100）

 

    能同时实时定量分析活细胞中线粒体呼吸和糖酵解的三磷酸腺苷 (ATP) 生成速率。是一种评估活细胞的功能与能量代谢相互作用的定量分析方法，用于研究细胞对基因修饰，药物处理及其它干预的反应。还能提供更多的驱使细胞活化，增殖和分化等细胞活动机制的信息。

 

Seahorse XF 细胞能量代谢表型测试试剂盒 (103325-100，103275-100）

 

    该试剂盒能快速测定细胞能量代谢表型，揭示其代谢潜能，提供细胞能量代谢的概况。是筛选线粒体和/或糖酵解功能调控药物的一种有效方法。

 

 Seahorse XF 细胞线粒体压力测试试剂盒（103015-100，103010-100）

 

    经过优化的最可靠的评估线粒体功能的试剂盒。通过该实验可获得与 ATP 生成相关的呼吸、极限和储备呼吸能力以及非线粒体呼吸等多个参数，进而提供关于线粒体功能障碍机制的信息。适用于研究不同细胞类型、候选药物以及遗传或生化干预导致的功能差异。

 

 Seahorse XF 糖酵解压力测试试剂盒（103020-100，103017-100）

 

    运用该试剂盒测试活细胞糖酵解相对功能。通过推动细胞糖酵解来测定糖酵解通路容量，并评估研究模型以提高糖酵解活性来满足代谢和生物能量需求的能力。

 

Seahorse XF 糖酵解速率测定试剂盒 （103344-100，103346-100）

 

    通过包括试剂盒，培养基、和软件在内的整套工具测量和计算糖酵解和线粒体呼吸 (CO2)导致的酸化，从而对活细胞中的糖酵解活动速率进行定量分析。该试剂盒可提供可靠、丰富及精确的糖酵解数据，适用于研究细胞疾病模型中瞬时反应和代谢转换。该方法能提供实时功能分析且成本低廉，明显优于乳酸终点分析法。

 

Seahorse XF 棕榈酸酯-BSA FAO 底物 （102720-100）

 

    研究活细胞长链脂肪酸 (LCFA) 氧化的自然底物。通常与细胞线粒体压力测试试剂盒配套使用。适用于研究 LCFA 氧化对遗传操控或药物治疗的响应。是分析细胞极限呼吸及压力反映对外源 LCFA 依赖性的最佳产品。

 

Seahorse XF 长链脂肪酸氧化压力测试试剂盒（103672-100）

Seahorse XF 葡萄糖/丙 酮酸氧化压力测试试剂盒（103673-100）

Seahorse XF 谷氨酰胺氧化压力测试试剂盒（103674-100）

 

基于XF 线粒体压力测试用于研究线粒体代谢，XF底物氧化氧化压力测试使用优化的通路特异性抑制剂来揭示细胞氧化三种主要底物的能力，这三种底物为线粒体代谢提供动力。每种试剂盒使用相关抑制剂测试一种底物。在分析之前采取慢性或急性干预措施 （遗传操控/药物暴露），以了解这些调控对特定线粒体底物氧化的影响。

Seahorse XF 棕榈酸酯氧化压力测试试剂盒（103693-100）

 

XF 棕榈酸酯氧化压力测试进阶实验详细说明了特异性分析活细胞中长链脂肪酸氧化通路的工作流程。尤其适用于研究干预措施（遗传操控和药物暴露）对 LCFA 氧化过程的特异性影响，可作为XF 长链脂肪酸氧化压力测试标准分析工作流程的补充和/或后续分析。

 

Seahorse XF Hu T 细胞活化测定试剂盒（103759-100）

 

为研究与 T 细胞活化相关的早期细胞命运和信号转导需求提供了一种新方法，跟踪 T 细胞活化的实时调节，通过标准化方案和优化试剂获得可靠结果

与众不同的探针板，细胞板

    

     安捷伦为研究人员提供了完整的消耗品使用方案，确保可以同时对两条能量代谢通路进行灵敏的动态检测。
    Seahorse XF FluxPaks 包括：探针板、细胞培养微孔板、校准液和用于校准的工具板。细胞消耗氧气（呼吸）和产生质子（糖酵解）导致“瞬态微室”中溶解氧和游离质子的浓度发生快速且易检测到的变化，可由距离单层细胞上方 200 微米处的固态传感器探针每隔数秒进行测量

 

    集成的加药系统可以按照用户设定的顺序向每个孔中依次加入多达 4 种化合物，从而完成完整的线粒体呼吸或糖酵解过程的动态检测。这一功能使研究人员能够通过按需求注射各种药物来调节代谢。每一个检测点都包括下图所示的一个测量周期，并且可以随着时间的推移，该检测样品的能量代谢的动态数据就会被绘制并显示出来。 

 

 

主要特性：探针板 

• 包含嵌入荧光体的聚合物的固态传感器探针能够检测细胞培养基中氧和质子的浓度 

• 专利的集成加药口，可用于添加化合物、增强剂、抑制剂、底物和与抗原偶联的微球 

• 在 XF 分析仪中采用专利的瞬态微室设计能够提高分析的灵敏度，还可以采集 OCR 和 ECAR (PER, gPER) 的信噪比 

• 采用多步骤方法将探针定位在探针板上，包括手动和机器操作的可视化检查 

• 每批产品都经过 100% 的质量控制，确保性能和批次之间的一致性

 

 

 

进行 XF 细胞代谢分析的完整试验方案。每个 FluxPak 包含：

 

探针板

能够同时进行生物各种能量代谢通路测量的重要部件。 

• 用于测量溶解氧和游离质子的非侵入式探针 

• 4 个加药口 

• 各批次产品保持高度一致性 

• 高精度的制造工艺 

• 从生产日期起保质期一年 

• 专利设计

 

细胞培养微孔板

具有各种孔板类型，可具体适用于不同的样品类型和研究需求。 

• 经过组织培养基处理和辐射灭菌 

• 锥形壁设计有助于减少试剂使用量和便于探针板准确定位插入 

• 每个孔底部的三个突起点决定微室的高度和体积 

• 遵守 SBS 标准 

• PS（聚苯乙烯）或者 PET（聚对苯二甲酸乙二醇酯）材料 

• 细胞培养微孔板适用于培养活细胞，分离的线粒体、胰岛和细胞球体

 

校准液和校准用工具板

校准液 ― 该试剂经过优化，更适用于 XF 探针板校准。预混合，即开即用。

工具板 ― 用于校准和水合过程。

 

根据使用的机型及用量，选择不同的FluxPak

目录号	XF96/XFe96机型
102416-100	XFe96 FluxPak（探针板18，培养板20，校准液，18块/箱）
102601-100	XFe96 FluxPak  mini（探针板6，培养板10，校准液，6块/箱）
102905-100	XFe96 Spheroid  FluxPak mini（探针板6，培养板6，校准液，6块/箱）
103729-100	XFe96 Fluxpak Mini  with PDL plates, 6x（探针板+PDL包被板套装）

 

目录号	XFe24机型
102340-100	XFe24 FluxPak（探针板18，培养板20，校准液，18块/箱）
102342-100	XFe24 FluxPak  mini（探针板6，培养板10，校准液，6块/箱）
103518-100	XFe24 Islet Capture  FluxPak（探针板6，培养板6，校准液，6块/箱）

 

目录号	XFP/XF HS机型
103022-100	XFp FluxPak (12/12)（探针板12，培养板12，校准液，12块/箱）
103721-100	Seahorse XFp FluxPak (PDL Plates,多聚赖氨酸包被)
103723-100	XF HS Mini FluxPak（XF HS Mini 探针板套装）
103724-100	XF HS Mini FluxPak(PDL Plates)（XF HS Mini PDL包被探针板套装）

 

为啥要用配套的培养基

 

    安捷伦 Seahorse XF 培养基专用于 XF 分析，推荐研究者使用，以获得最佳试验结果。XF 培养基以标准细胞培养基组分（DMEM 或 PRMI）为基础，在以下方面进行了改进：

 无碳酸氢盐和低缓冲容量：利于细胞外酸化率的检测 

 无底物添加：适用于用户的各种不同需求 

 低浓度酚红或无酚红：确保 pH 值测量的准确性 

     安捷伦 Seahorse 现提供在 37 ºC 下预调节 pH 为 7.4 的缓冲 XF 培养基（部件号 103575-100 和 103576-100）。这些培养基含有少量的 HEPES 缓冲液。如果在此培养基中添加推荐浓度的 XF 补充剂（如 XF 葡萄糖溶液、XF 丙 酮酸盐溶液和 XF 谷氨酰胺溶液），就无须再调节 pH 值，从而简化工作流程并缩短试验准备时间。这些 pH 预调培养基具有均衡稳定的缓冲容量，从而使得试验结果更加稳定可信。

 

用 pH 7.4 的 XF DMEM 或 RPMI 培养基制备安捷伦 Seahorse XF 试验用培养基 的最佳实践方案：

 

1. 在使用当天将足量 pH 7.4 的 XF DMEM 或 RPMI 培养基转移至一个新的无菌瓶中（记得在安全柜中打开）。注：如果当天试验只需少量培养基，建议不要预热整瓶，且每次使用过后拧紧瓶 盖以保持 pH 值不变

 

2. 在生物安全柜中加入适量 XF 补充剂/底物  注：必须在推荐的浓度范围内使用 XF 补充剂，以确保分析培养基具有准确的 最终 pH 值。如果使用其他供应商提供的其他品牌的补充剂，则无法保证培养 基具有准确的 pH 值。推荐的补充剂浓度为葡萄糖 0–10 mmol/L、丙 酮酸盐 0–1 mmol/L、谷氨酰胺 0–2 mmol/L。特定补充剂浓度取决于不同试验需求。参 见 XF 分析培养基的制备流程和 XF 分析试剂盒用户指南了解详细信息。如果培养 基和所有补充剂的无菌状态未受到破坏，则不需要对最终分析培养基进行过滤除菌

 

3. 将培养基预热到 37 ºC。分析培养基即可用于分析（无需调节 pH）

 

用需要调节 pH 的培养基制备安捷伦 Seahorse XF 分析培养基的最佳实践方案： 

 

1. 在使用当天将足量 XF 培养基转移至一个新瓶中（记得在安全柜里打开）

2.在生物安全柜中加入适量补充剂/底物  注：制备用于糖酵解速率测定的分析培养基时，需要在 DMEM 培养基中分别加入 5 mmol/L 或 1 mmol/L 的 HEPES 缓冲液。而对其他 XF 分析的培养基，可以不加 HEPES

3. 将培养基预热到 37 ºC 

4. 将 pH调至 7.4 ± 0.1

5. 调节 pH 值后对培养基进行过滤灭菌。分析培养基即可用于分析

安捷伦 Seahorse XF 培养基、缓冲液和补充剂产品

目录号	产品描述
103575-100	XF DMEM 培养基，pH 7.4  ,500ml ,无酚红
103576-100	XF RPMI 培养基，pH 7.4，500ml,无酚红
102353-100	XF Base Medium,2*1000ml,含酚红
103193-100	XF Base Medium 培养基 100ml,含酚红
103577-100	XF 1.0M   葡萄糖,50ml /瓶
103578-100	XF 100 mM   丙 酮酸,50ml /瓶
103579-100	XF 200 mM 谷氨酰胺,50ml /瓶

注：所有 Seahorse XF 培养基/缓冲液/补充剂均经内毒素测试，应保存在 4 ºC 下，谷氨酰胺溶液除外，该溶液需要保存在 -20 ºC 下

选购指南Seahorse XF 实时 ATP 生成速率测定试剂盒（103592-100）

安捷伦 Seahorse ATP 实时生成速率测定是唯一能够使用免标记技术实时地在活细胞中同时定量糖酵解与线粒体来源生成的三磷酸腺苷 (ATP) 的方法。实时动态定量分析提供了细胞生物能量代谢的动态图像，为研究人员分析细胞表型和功能提供了独特见解。该测定应利用特定 pH 值的 XF 培养基进行。 本方法具有广泛的应用前景，可用于评估代谢表型变化，揭示细胞活化、增殖和分化过程中的通路贡献情况。

Seahorse XF 细胞线粒体压力测试试剂盒（103015-100）

安捷伦 Seahorse 细胞线粒体压力测试试剂盒是评估线粒体功能的公认标准分析。一次分析即可获得多个参数，包括基础呼吸、ATP 关联呼吸、最大呼吸、备用呼吸能力以及非线粒体呼吸，进而提供关于线粒体功能障碍机制的信息。适用于研究不同细胞类型、候选药物以及遗传或生化干预导致的功能差异。每一个试剂盒都含有足以进行 6 次全板测试的材料，有两种包装规格可供选择。XF 试剂盒用于安捷伦 Seahorse XF96/XFe96 及 XF24/XFe24 分析仪。XFp 试剂盒用于安捷伦 Seahorse XF HS Mini 及 XFp 分析仪。

Seahorse XF 糖酵解速率测定试剂盒（103344-100）

安捷伦 Seahorse 糖酵解速率测定可对活细胞中的糖酵解实现精确测量，揭示瞬态响应和终点法乳酸测定中无法辨别的快速代谢转换。在安捷伦 Seahorse XF 分析仪上运行该测定，可量化糖酵解特异性的质子释放，应利用特定 pH 值的 XF 培养基进行。糖酵解速率测定试剂盒含有足以进行 6 次全板分析的材料，有两种包装规格可供选择。XF 试剂盒用于安捷伦 Seahorse XF/XFe96 和 XFe24 分析仪，XFp 试剂盒用于安捷伦 Seahorse XF HS Mini 和 XFp 分析仪。

Seahorse XF Hu T 细胞活化测定试剂盒（103759-100）

安捷伦 Seahorse XF Hu T 细胞活化测定试剂盒使用 Seahorse XF 分析仪测量刺激开始几分钟内的人 (Hu) T 细胞活化反应。上述过程通过测定与糖酵解通路依赖型能量产生相关的质子释放率 (PER) 实现，理论基础是 T 细胞活化伴随细胞能量生成的快速转换以及支持有效增殖、尺寸扩大和分化的能量需求的快速增长。

根据使用的机型，选择不同的探针板搭配

Seahorse XFe 96 Analyzer消耗品

货号	消耗品	规格
103575-100	Seahorse XF DMEM 检测液, pH 7.4	500 mL
103576-100	Seahorse XF RPMI 培养基, pH 7.4	500 mL
103577-100	Seahorse XF 1.0 M Glucose solution葡萄糖溶液	50 mL
103578-100	Seahorse XF 100 mM 丙 酮酸溶液	50 mL
103579-100	Seahorse XF 200 mM 谷氨酰胺溶液	50 mL
102601-100	XFe96检测板（小包装）	6个XFe96探针板，10个XFe96细胞板，1瓶校准液（500 mL）
102416-100	XFe96检测板（大包装）	18个XFe96 探针板，20个XF96 细胞培养板，1 瓶校准液(500 mL)
103015-100	Seahorse XF 细胞线粒体压力测试试剂盒	每个试剂盒 6 包，每包包含寡霉素、FCCP 和鱼藤酮/抗霉 素 A 各一瓶
103020-100	Seahorse XF 糖酵解压力测试试剂盒	每个试剂盒 6 包，每包包含寡霉素、葡萄糖和 2-脱氧-葡萄糖各一份
103344-100	Seahorse XF 糖酵解速率测定试剂盒	每个试剂盒 6 包，每包包含鱼藤酮/抗霉 素A和 2-脱氧-葡萄糖各一份

注：1. 培养基有两种，根据培养细胞的培养基类型来选择。比如，如果您用DMEM培养细胞，就选择103575-100；如果您用RPMI 1640培养细胞，就选择103576-100。

2. 板子包装根据实验次数选择，次数多选择102340-100（大包装），次数少选择102342-100（小包装）。

Seahorse XFe 24 Analyzer消耗品

货号	消耗品	规格
103575-100	Seahorse XF DMEM 检测液, pH 7.4	500 mL
103576-100	Seahorse XF RPMI 培养基, pH 7.4	500 mL
103577-100	Seahorse XF 1.0 M Glucose solution葡萄糖溶液	50 mL
103578-100	Seahorse XF 100 mM 丙 酮酸钠溶液	50 mL
103579-100	Seahorse XF 200 mM 谷氨酰胺溶液	50 mL
102342-100	XFe24检测板（小包装）	6 XFe24 探针板 10 XF24 细胞培养板 1 瓶校准液 (500ml)
103015-100	Seahorse XF 细胞线粒体压力测试试剂盒	每个试剂盒 6 包， 每包包含寡霉素、FCCP 和鱼藤酮/抗霉 素 A 各一瓶
103344-100	Seahorse XF 糖酵解速率测定试剂盒	每个试剂盒 6 包，每包包含鱼藤酮/抗霉 素A和 2-脱氧-葡萄糖各一份

注：培养基有两种，根据培养细胞的培养基类型来选择。比如，如果您用DMEM培养细胞，就选择103575-100；如果您用RPMI 1640培养细胞，就选择103576-100。

Seahorse XFp 分析仪消耗品

货号	消耗品	规格
103575-100	Seahorse XF DMEM 培养基, pH 7.4	500 mL
103576-100	Seahorse XF RPMI 培养基, pH 7.4	500 mL
103577-100	Seahorse XF 1.0 M 葡萄糖溶液	50 mL
103578-100	Seahorse XF 100 mM 丙 酮酸钠溶液	50 mL
103579-100	Seahorse XF 200 mM 谷氨酰胺溶液	50 mL
103022-100	XFp检测板	12个XFp探针板 12个XFp 细胞培养板 1 瓶校准液(100 mL)
103010-100	Seahorse XFp细胞线粒体压力测试试剂盒	每个试剂盒 6 包 每包包含寡霉素、FCCP 和鱼藤酮/抗霉 素 A 各一瓶
103346-100	Seahorse XFp糖酵解速率测定试剂盒	每个试剂盒 6 包 每包包含2-DG和鱼藤酮/抗霉 素 A 各一份

注：培养基有两种，根据培养细胞的培养基类型来选择。比如，如果您用DMEM培养细胞，就选择103575-100；如果您用RPMI 1640培养细胞，就选择103576-100。