博奥龙BDXB0020胰酶(Trypsin-EDTA 0.25%)(含酚红)上海睿安生物13611631389

胰酶(Trypsin-EDTA 0.25%)(含酚红)(1✕)

保存温度:-20℃

概述

胰酶(Trypsin-EDTA)是最常用的细胞分离试剂，为223个氨基酸组成的单链多肽，是胰蛋白酶原(Trypsinogen)在Lys6和Ile7之间切除氨基N末端6肽(Hexapeptide)得到的。胰酶属于丝氨酸水解酶家族，活化位点包括His46和Ser183，胰酶裂解Lysine的羧基末端和Arginine的氨基末端，水解效率在任何一端存在酸性氨基酸时降低，而当Proline存在于裂解位点的羧基末端一侧时，水解反应不能发生。胰酶的最佳使用pH值为7.2-9.2。

成分

操作步骤

注：使用前将胰酶解冻，保存在4℃，建议不要反复冻融。

1. 移除细胞培养瓶/皿中的培养液，用适量不含钙和镁离子的PBS或D-PBS快速冲洗细胞1-2次，完全移除培养瓶/皿中的液体；

2. 加入适量(250px培养皿加入0.5ml)胰酶，转动培养瓶/皿，让细胞和胰酶充分接触；

3. 置于37℃培养箱中，孵育1-5min(不同细胞类型有所不同)；

4. 轻轻磕击培养瓶/皿，在倒置显微镜下观察，大多数细胞荧光橙悬浮状态；

5. 加入培养基，用移液管吹打5-10次，按照实验要求将细胞种植到新的培养瓶/皿中。

注意事项

1. 胰酶对细胞有损伤，应尽量缩短孵育时间；

2. 如果细胞培养在不含血清的培养基中，胰酶消化完毕，加入PBS，500✕g离心10分钟，移除PBS，将细胞重悬于所用的培养基中。