Millipore货号17-10489现货ChIPAb+雄激素受体-ChIP经验证的抗体和引物组13611631389上海睿安生物

ChIPAb+雄激素受体-ChIP经验证的抗体和引物组

from rabbit,purified by affinity chromatography

别名:Dihydrotestosterone receptor,Nuclear receptor subfamily 3 group C member 4,DHTR,NR3C4,AR

说明

一般描述

对每批、每次的全部ChIPAb+抗体的染色质沉淀进行单独验证。每个ChIPAb+抗体组均包含对照引物(通过qPCR对每个批次进行检测)，以在基因座特异性环境下对IP结果进行生物学验证。提供了qPCR方案和引物序列，使研究人员能够在染色质环境中使用我们的抗体时验证ChIP方案。每组还包括阴性对照抗体，以确保ChIP反应的特异性。
ChIPAb+ 雄激素受体组包括雄激素受体抗体，正常兔IgG和扩增人前列腺特异性抗原(PSA)增强子区域的85bp区域的对照引物。雄激素受体抗体和阴性对照以可扩展的“每个ChIP”反应大小提供，可用于功能性验证雄激素受体相关染色质的沉淀。
雄激素受体(AR)是一种核受体，通过与雄激素睾酮或二氢睾酮结合而被激活。雄激素受体的主要功能是作为调节基因表达的DNA结合转录因子。然而，雄激素受体还具有独立于DNA结合的其他功能。雄激素受体与孕激素受体关系最为密切，较高剂量的孕激素可阻断雄激素受体。

特异性:可识别雄激素受体。与雌激素、孕激素或糖皮质激素受体无交叉反应。

免疫原:人雌激素受体1-21位氨基酸对应的肽(MEVQLGLGRVYPRPPSKTYRG)。

应用

染色质免疫沉淀:
将LNCaP细胞激素饥饿72小时，然后用1µM CI-4AS-1诱导过夜。 使用1µg正常兔IgG(产品编号PP64B)或1µg抗雄激素受体(产品编号CS207339)和Magna ChIP HiSens(目录编号17-10460)，对每个IP~1e5细胞当量进行ChIP。 使用ChIP引物，PSA(产品编号CS207379)作为阳性基因座，并使用GAPDH启动子(产品编号22-004)作为阴性基因座，通过qPCR验证了雄激素受体相关DNA片段的成功免疫沉淀。 数据表示为每个IP样品相对于每个扩增子和ChIP样品的输入染色质的输入百分比。
请参阅Magna ChIP HiSens(目录号17-10460)或EZ-MagnaChIP HiSens(目录号17-10461)方案以获取实验详细信息。

染色质免疫沉淀:
将LNCaP细胞激素饥饿72小时，然后用载体(未处理)或1µM CI-4AS-1(处理)诱导过夜。 使用3µg正常兔IgG(产品编号PP64B)或3µg抗雄激素受体(产品编号CS207339)和Magna ChIP HiSens(目录编号17-10460)，对每个IP~1e5细胞当量进行ChIP。 使用ChIP引物，PSA(产品编号CS207340)通过qPCR验证了雄激素受体相关DNA片段的成功免疫沉淀，阴性基因座是HNRP2AB1引物组。 报告了报告阳性基因座比阴性基因座富集倍数的Delta Delta Ct计算。
请参阅MagnaChIP HiSens(目录号17-10460)或EZ-MagnaChIP HiSens(目录号17-10461)方案以获取实验详细信息。

蛋白质印迹分析:该抗体的1:200-1:500稀释液在20μg人LNCaP细胞的RIPA裂解液中检测到雄激素受体。

免疫沉淀:代表性批次从500μg LNCaP RIPA细胞裂解液中免疫沉淀雄激素受体。

免疫细胞化学:代表性批次的1:50稀释液在用2%甲醛/5%乙酸固定并用0.1%Triton X-100透化的LNCaP细胞中显示出雄激素受体的阳性免疫染色。
ChIPAb+ &雄激素受体组包括&雄激素受体抗体、正常兔IgG & 扩增人前列腺特异性抗原(PSA)增强子区域的85bp区域的对照引物。
研究子类别:转录因子
研究类别:表观遗传学&核功能

包装:每组25次测定。推荐用于:每个染色质免疫沉淀约1µg抗体(取决于生物学背景)。

质量

染色质免疫沉淀:
使用1µg正常兔IgG(产品编号PP64B)或1µg抗雄激素受体(产品编号CS207339)和Magna ChIP^® HiSens试剂盒(目录编号17-10460)，对用激素饥饿(72H)制备超声染色质，然后诱导(1µM CI-4AS-1)过夜LNCaP细胞(每个IP约1e5细胞当量)进行染色质免疫沉淀。使用ChIP引物，PSA(产品编号CS207340)通过qPCR验证了雄激素受体相关DNA片段的成功免疫沉淀。 
有关实验详细信息，请参阅MagnaChIP HiSens(目录号17-10460)或EZ-MagnaChIP HiSens(目录号17-10461)方案。

外形

免疫亲和纯化
抗雄激素受体(兔多克隆)，产品编号CS207339。一个小瓶，含有125µl(0.2µg/µL)纯化的兔多克隆，溶于含有0.1M Tris-甘氨酸(pH 7.4)、150mM NaCl和0.05％叠[dié][dàn]化钠，然后添加30%甘油的缓冲液中。 储存于-20°C。 

正常兔IgG，产品编号PP64B。一个小瓶，包含125µg(1.0µg/µl)兔IgG，溶于125µl含有0.05%叠[dié][dàn]化钠的储存缓冲液中。储存于-20°C。

ChIP引物，PSA。产品编号CS207340。一个小瓶，包含75 μL 5 μM每种对人前列腺特异性抗原增强子区域特异的引物。（chr19:51354179+51354263, hg19 build）储存于-20°C。
用于： 5’ GCC TGG ATC TGA GAG AGA TAT CAT C 3’
REV: 5’ ACA CCT TTT TTT TTC TGG ATT GTT G 3’

储存及稳定性:自收到之日起在-20°C可稳定保存1年。处理建议：第一次融化后，在取下瓶盖之前，将小瓶离心并轻轻混合溶液。分装到微量离心管中，并储存于-20°C。避免反复冻融循环，以免损坏IgG和影响产品性能。

分析说明(对照):包括正常兔IgG和前列腺特异性抗原(PSA)增强子区域特异性引物。

同行评审论文(部分文献)

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