【产品名称】

通用名称：核酸提取或纯化试剂（磁珠法）

【包装规格】

50人份/盒

【预期用途】

用于核酸的提取、富集、纯化等步骤。其处理后的产物用于临床体外检测使用。

【检验原理】

本产品通过直接破坏细胞膜使基因组DNA释放，再应用硅胶膜技术，具有选择性结合特性，可高效回收核酸，通过多个清洗步骤除去杂质，从细胞中高效纯化核酸，纯化的核酸产量高。

【主要组成成份】

【贮存条件及有效期】

贮存于2°C-30°C干燥的环境中，有效期限为24个月。

【适用仪器】

高速离心机，迷你离心机，磁力架、金属浴，涡旋震荡仪。

【样本要求】

1.      样本类型：宫颈脱落细胞。

2.      样本用量：3ml

3.      样本的保存要求：

本试剂盒适用于从宫颈脱落细胞中提取人类基因组DNA进行检测。样本采集后应及时进行处理及检测，在2℃～8℃可保存7天，置于≤-20℃条件下可保存1年，避免反复冻融。样本运输采用泡沫盒加冰密封运输。

【操作步骤】

1、试剂准备

    试剂盒使用前，请确保裂解液完全溶解无结晶析出。

2、样本准备

取3ml保存在细胞保存液中的脱落细胞至1.5mL离心管中，12000rpm离心2分钟，去除上清，加200ul超纯水重悬待用。

3、核酸提取纯化

3.1裂解细胞

向上述1.5mL离心管中依次加入：20ul蛋白酶K、180ul裂解液，盖紧管盖，涡旋混匀，把离心管在56℃金属浴中放置10±1分钟。

3.2核酸与磁珠结合

    向上述1.5mL离心管中加入：320ul结合液，260ul无水乙醇，涡旋混匀，低速瞬时离心，再加入磁珠10ul涡旋混匀10s，室温放置10min（每2min上下颠倒5次，使磁珠分布均匀）；

3.3核酸洗涤

结束后，将上述1.5mL离心管低速瞬时离心，放入磁力架磁吸2min，丢弃废液。

向上述1.5mL离心管中加入0.6mL洗液A，涡旋混匀，低速瞬时离心，放入磁力架磁吸2min，丢弃废液。

向上述1.5mL离心管中加入0.6mL洗液B，涡旋混匀，低速瞬时离心，放入磁力架磁吸2min，丢弃废液。

向上述1.5mL离心管中加入0.6mL洗液C，涡旋混匀，低速瞬时离心，放入磁力架磁吸2min，丢弃废液。

将上述1.5mL离心管低速瞬时离心，放入磁力架磁吸1min，吸去多余的废液，打开上述1.5mL离心管盖，室温干燥2分钟。

3.4核酸洗脱

向上述1.5mL离心管中加入50-100µL洗脱液，盖紧管盖，涡旋混匀，56°C金属浴孵育3min，每隔1分钟涡旋混匀1次，约5秒（使磁珠充分悬浮在洗脱液中），放入磁力架磁吸2min，将试剂转移至新的1.5mL离心管，盖紧管盖。如果提取的核酸不立即使用，可将其置于-20°C以下储存。

【检测方法的局限性】

1、只能用于体外诊断。

2、该产品的有效性仅针对于保存于细胞保存液的脱落细胞样本。对于其它样本的收集方式的有效性没有做测试。

【性能指标】

经本试剂盒提取的核酸，检测Ct值的CV≤5.0%。

【注意事项】

1. 实验前请仔细阅读本说明书。

2. 为了避免样本中任何潜在的生物危险，检测样本应视为具有传染性物质，避免接触到皮肤和黏膜；样本的处理建议在可防止气雾外流的生物安全柜中操作；样本制备区所用过的试管、吸头需打入盛有消毒剂的容器，并与废物一起灭菌后方可丢弃；样本操作和处理均需符合相关法规要求：卫生部《微生物医学实验室生物安全通用准则》和《医疗废物管理条例》。

3.为保证实验结果的准确性和可靠性请使用已校准的移液器，选用合格的一次性使用的反应管、离心管、枪头等进行样本处理及配液等操作，所有用具应不含DNA酶和RNA酶。

4. 试剂盒组分需在效期内使用，不使用本试剂盒提供的组分进行实验将可能导致错误结果。

5. 实验室管理应严格按照PCR基因扩增实验室的管理规范，实验人员必须进行专业培训，实验过程严格区分进行（试剂准备区、样本制备区、扩增区），实验操作的每个阶段使用专用的仪器和设备，各区各阶段用品不能交叉使用。

6. 完成样本核酸提取后，建议马上进行下一步实验，否则请保存于-20℃待用（24小时内）。

7. 实验结束后用10%次氯（消毒水）酸钠和75%酒精处理工作台和移液器，然后用紫外灯照射20-30min。

粤穗械备20191754号