TOLL样受体放免试剂盒说明书
TLRs-3（HY-10204） RIA KIT
Toll样受体家族（Pattern recognition receptor,TLRs）成员属模式识别受体（Pattern recognition receptor,PRR），是重要的天然免疫分子。目前对其研究主要集中在对细菌及病毒的识别机制上，并被视为联系天然免疫与获得性免疫之间的桥梁。目前，在哺乳动物及人类中已经发现的人TIRs家族成员有11个。其中了解比较清楚的有TIR2，TIR4，TIR5和TIR9。人的TLRs家族基因定位分别是定(TLR1,2,3,6,10)4号染色体，9号染色体(TLR4),1号染色体(TLR5),3号染色体(TLR9)，x号染色体(TLR7,8)。根据TLRs细胞分布特征，可将其分为普遍存在型(TLR1)、限制存在型(TLR2、TLR4、TLR5)及特异存在型(TLR3)3类。TLR3特异识别病毒复制的中间产物dsRNA，从而激活NFкB和干扰素IFNβ前体。Doyle S E等证实，抗TLR3单克隆抗体能抑制成纤维细胞IFNβ的产生。Christopher A等证实TLR3还具有调控鼻病毒对人支气管细胞感染的能力，这也说明了TLR3在宿主抵抗活病毒中发挥重要的作用。

TOLL样受体放免试剂盒标本的收集：空腹抽静脉血2ml离心取血清，-20℃保存三个月。

该药盒主要应用范围：
* 抗病毒的研究

药盒组成：（常温运输，4℃保存）
1． Toll缓冲液1瓶
2． Toll（第二抗体）1瓶，用前充分摇匀。
3． Toll标准品5瓶，浓度为5、10、20、40、80 ng/mL
4． Toll抗体 1瓶。
5． 125I –Toll 1瓶

TOLL样受体放免试剂盒测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：
Toll RIA加液程序 （单位： ul ）
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I- BMP-7 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500

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混匀，室温放置15分钟后，3500 转/分 4℃离心20 min，弃上清液，测沉淀cpm数。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值，或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。
TOLL样受体放免试剂盒注意事项：
本月标准品每瓶用 ml 缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液溶解
本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
本试剂盒主要技术指标：
1、 NSB：<5%。
2、 灵敏度：<0.5 ng/ml。
3、 标准曲线范围：5-80ng/ml
4、 批内变异系数：CVw<7.3%；
批间变异系数：CVw < 10% 。
5、 正常参考值：38ng/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。

本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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