eTeSR™培养基的优势:
- 支持细胞保持高质量状态,同时通过增强的缓冲体系、关键成分(包括FGF2)的稳定性和优化的代谢物允许灵活换液
- 增加细胞得率,同时减少日常维持培养期间与单细胞传代或细胞高密度相关的压力
- 使用兼容的基因编辑、克隆、分化和冻存方案完成您的工作流程
- 消除细胞自发性分化eTeSR™与每日换液及间隔换液(restricted feeding)的培养方案兼容,同时能保持高细胞质量和同等表现性能,此外还可与各种细胞培养基质一起使用,包括Corning® Matrigel®hESC-Qualified Matrix和CellAdhere™ Laminin-521(产品号 #77003)。
更高的扩增效率
四个hPSC细胞系使用TrypLE™进行单细胞传代,并在Corning® Matrigel®包被板上使用mTeSR™1、mTeSR™ Plus或eTeSR™维持培养。
图1 单细胞培养的hPSC在eTeSR™中表现出更好的细胞扩增状态
细胞维持培养11代,使用mTeSR™1需每日换液,而使用mTeSR™ Plus和eTeSR™则采用在第4天和随后第5天的间隔换液培养方案。通过将每次传代结束时的细胞数除以传代时接种的细胞数来计算累积的细胞数。结果显示,在eTeSR™中进行单细胞培养的hPSC拥有更高的细胞扩增效率。
细胞贴壁效率高
细胞接种后24小时,使用Hoechst对来自STiPS-R038的hPSC细胞系染色。将细胞以4.7 x 104个细胞/cm2的密度分别接种到Matrigel®包被的96孔板中,并分别加入含10μM Y-27632的mTeSR™1、mTeSR™ Plus或eTeSR™培养基。将培养板固定后,用Hoechst 33342染色,并使用ImageXpress® Micro 4显微镜成像。
图2 hPSC细胞系显微成像
比较培养在上述3种培养基中的细胞贴壁效率,发现eTeSR™能提高hPSCs以单细胞接种时的贴壁效率。
更高的遗传稳定性
eTeSR™的配方中加入了包括FGF2在内的关键稳定成分,提高缓冲能力并优化代谢物,从而得到与其他hPSC维持培养基相比具有更高遗传稳定性的高质量hPSCs。
图3 eTeSR™能够改善hPSC单细胞传代并长期维持培养的遗传稳定性
当在eTeSR™中培养时,与主要针对聚集体传代优化的培养基相比,单独克隆的H1和H9 hPSC中检测到的遗传变异数量显着减少(由hPSC遗传分析试剂盒检测),并通过FISH实验进行了证实。每个方框/正方形代表培养20周(30代)的单个克隆。