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TSBL21(DE3)pLysS Chemically Co
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品牌 擎科生物产地武汉
过期 长期有效
更新 2025-08-12 18:52
 
详细信息
TSBL21(DE3)pLysS Chemically Competent Cell
低本底高效表达感受态,转化效率>108 cfu/μg,可用于毒性蛋白的表达   【产品简介】
TSBL21(DE3)pLysS菌株衍生于大肠杆菌BL21系列菌株,包含一个低拷贝的氯霉素抗性质粒pLysS(可与pET28a、pGEX4T的等常见质粒兼容),可少量表达T7溶菌酶,在未诱导时,该酶能与T7 RNA聚合酶结合并抑制其功能,当加入IPTG诱导时,T7 RNA聚合酶大量表达,细胞中少量的T7溶菌酶不会对大量存在的T7 RNA聚合酶产生较大抑制。因此该质粒就可以降低外源基因的泄露表达,也不干扰IPTG诱导表达,相对于BL21(DE3)可以降低90%的本底表达,可用于毒性蛋白的表达。本产品经优化的感受态制备工艺制备而成,使用pUC19质粒DNA检测,转化效率可达1×108 cfu/µg。

【产品特点】
蛋白表达能力优异;
转化效率大于 1×109 cfu/µg;
适合毒蛋白表达。

【基因型】
F- ompT hsdS(rB- mB-) gal dcm (DE3)pLysS Camr

【产品组成及保存】
-83~-78℃保存6个月。
组分 规格
TSBL21(DE3)pLysSChemically Competent Cell 10 ×100 µL
pUC19(control vector) 10 µL(10 pg/µL)

【操作流程】
加入目的 DNA(质粒或连接产物),轻轻混匀后进行如下步骤:


【注意事项】
感受态细胞在冰上融化;
实验操作轻柔;
请勿反复冻融;
转化后涂板,平板不可加入氯霉素,否则双抗生素条件下,细菌生长十分缓慢,但诱导表达摇菌时,应加入双抗,防止氯霉素质粒丢失(此时生产速度正常)。

【问题讨论】
Q1:TSBL21(DE3)pLysS是如何表达毒性蛋白的?
A1:TSBL21(DE3)pLysS来源于BL21,携带pLysS质粒,具有氯霉素抗性。pLysS含有表达T7溶菌酶的基因,T7溶菌酶可以作用于大肠杆菌细胞壁上的肽聚糖溶解大肠杆菌,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰IPTG诱导的表达,适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
  本试剂产品仅供科学研究或进一步生产使用,不可用于临床诊断或治疗。