疏水层析是依据蛋白质疏水性差异分离的，即根据蛋白质和疏水介质表面的疏水基团的可逆相互作用进行分离。疏水力在高离子强度下被增强，因此在高离子强度环境中结合，通常采用降低离子强度的方式进行洗脱。独特的吸附分离模式使得疏水层析成为硫酸铵盐析后或离子交换高盐洗脱后理想的纯化方式。

 

应用案例

Phenyl Focurose FF(HS)和Phenyl Focurose HP分离不同疏水性蛋白
样品：4mg/mL 混合蛋白 (Cytochrome C : Ribonuclease A : Lysozyme =1:2:1)
柱子：HT01,1.0mL
平衡液：0.1M Na₂HPO₄ , 1.7M (NH₄)₂SO₄ , pH7.0
洗脱液：0.1M Na₂HPO₄ , pH7.0
流速：1mL/mim

 

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Tips

★不同配基及配基浓度介质其疏水作用力不同。
★不同蛋白疏水层析时，或者使用不同疏水层析介质纯化时，缓冲液中盐浓度不一样。
★温度和pH对蛋白疏水性影响较大，疏水层析过程中pH和温度要恒定。