Rat IL-6 ELISA Kit，Valukine™

大鼠 IL-6 ValukineTM ELISA 试剂盒
目录号：VAL901
适用于定量检测天然和重组大鼠 IL-6 的浓度
科研专用，不可用于临床诊断

有效期详见试剂盒包装标签
Novus 试剂盒确保在你收货日期 3 个月内有效

I. 背景
白细胞介素6 (IL-6)是一种多功能细胞因子，在宿主防御、急性期反应、免疫应答、
神经细胞功能和造血等方面发挥重要作用(1-5)。它由多种正常和转化的淋巴和非淋巴细
胞表达。IL-6的产生受到许多信号的上调，如有丝分裂或抗原刺激、脂多糖、钙离子载
体、细胞因子和病毒。IL-4、IL-10和IL-13抑制单核细胞中IL-6的表达。在许多病理条件
下，包括细菌和病毒感染、创伤、自身免疫性疾病、炎症和恶性肿瘤，都观察到血清IL-6
水平升高(1-5)。IL-6是细胞因子IL-6超家族的原型成员，这些细胞因子共享gp130作为
信号转导所需的成分(4)。大鼠、小鼠和人IL-6 cDNA已被克隆(6-9)。大鼠IL-6 cDNA编
码一个211个氨基酸(aa)残基的前体多肽和一个疏水信号肽，该信号肽被切割后产生
187aa残基的成熟蛋白。在蛋白质序列水平上，大鼠与人的同源性约为39%，小鼠与大
鼠的同源性约为87%。尽管人和小鼠IL-6对小鼠细胞具有同等活性，但小鼠IL-6在人类
细胞上不具有活性(9)。介导IL-6生物活性的高亲和力IL-6受体复合物由两种膜糖蛋白组
成：一种80 kDa低亲和力IL-6结合受体 (IL-6 R)和一种缺乏IL-6结合能力的130 kDa信号
转导蛋白(gp130)。IL-6与IL-6 R的结合招募gp130形成三聚体复合物，该复合物二聚化
形成六聚体复合物，从而传导IL-6信号(4)。在血液中检测到可溶性的IL-6 R和gp130 (11,
12)。可溶性IL-6 R能与IL-6结合，诱导膜gp130的同源二聚化及随后的信号转导。

19
II. 概述
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗大鼠IL-6抗体包被于微孔板上，样品和标准品
中的大鼠IL-6会与固定在板上的抗体结合，游离的成分被洗去；接着加入生物素化的抗
大鼠IL-6检测抗体进行孵育，洗涤去除未结合的物质后，加入链霉亲和素标记的辣根过
氧化物酶（streptavidin-HRP）孵育。洗涤去除未结合的试剂后，加入TMB底物溶液。
溶液颜色与结合的目标蛋白成正比；加入终止液；用酶标仪测定吸光度。
B. 检测局限
 仅供科研使用，不可用于体外诊断；
 该试剂盒适用于细胞培养上清样本和大鼠血清样本；
 请在试剂盒有效期内使用；
 不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用；
 样本值若大于标准曲线的最高值，应将样本用标准品稀释液（1×）稀释后重新检测；
 检测结果的不同可由多种因素引起，包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗
板技术、反应时间或温度、试剂盒的储存等。

B. 回收率
在细胞培养基样本中掺入检测范围内不同水平的大鼠IL-6，测定其回收率。回收率范围
在93-115.6%，平均回收率在106.3%。
在大鼠血清样本中掺入检测范围内不同水平的大鼠IL-6，测定其回收率。回收率范围在
73.3-111.5%，平均回收率在95%。
C. 灵敏度
大鼠IL-6的最低可测剂量（MDD）一般小于13.77pg/mL。
MDD是根据20个重复的零标准品孔的吸光度值的平均值加两倍标准差计算得到的相对
应浓度。
D. 校正
此ELISA试剂盒经由R&D Systems生产的 大肠杆菌表达的高纯度重组大鼠IL-6蛋白所
校正。

F. 样本预值
血清样本 - 使用本试剂盒检测了4份大鼠血清样本中IL-6的水平。4份样本的检测值均低
于大鼠IL-6的最低标准品，250pg/mL。
G. 特异性
将以下因子配置成50ng/mL的浓度来检测没有观察到明显的交叉反应或干扰。
Recombinants
rat CNTF
human IL-6
porcine IL-6
含有50ng/mL重组小鼠IL-6的样品检测值为350pg/mL（0.7%交叉反应性）。