Rat IL-1β/IL-1F2 ELISA Kit，Valukine™

产品信息及操作手册
大鼠 IL-1β/IL-1F2 ValukineTM ELISA 试剂盒
目录号：VAL903
适用于定量检测天然和重组大鼠 IL-1β/IL-1F2 的浓度
科研专用，不可用于临床诊断

有效期详见试剂盒包装标签
Novus 试剂盒确保在你收货日期 3 个月内有效

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I. 背景
IL-1是指两种多效细胞因子IL-1 α (IL-1F1)和IL-1 β (IL-1F2)，它们是不同基因的产
物。IL-1α 和IL-1β是结构相关的多肽，在大鼠中具有约26%的氨基酸(aa)同源性。这两
种蛋白质都是由多种细胞响应炎症因子、感染或微生物内毒素而产生的。虽然IL-1α和
IL-1β是独立调节的，但它们与同一受体结合并发挥相同的生物学作用。IL-1RI直接与
IL-1α或IL-1β结合，然后与IL-1R辅助蛋白(IL-1R3/IL-1RAcP) 结合，形成具有信号转导
能力的高亲和力受体复合物。IL-1 RII对IL-1β具有高亲和力，但作为诱饵受体和IL-1β活
性的负调节因子发挥作用。IL-1ra通过阻止IL-1 α和IL-1 β与IL-1 RI相互作用而起到竞争
性拮抗剂的作用(1-4)。大鼠IL-1β cDNA编码268 aa前体。116 aa前肽被半胱氨酸蛋白
酶IL-1β转化酶(Caspase-1/ICE)在细胞内裂解，生成活性细胞因子(5)。17 kDa成熟大鼠
IL-1β与棉鼠和小鼠具有90%的aa序列同源性，与犬、马、猫、人、猪和恒河猴IL-1β具
有65%-77%的同源性。

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II. 概述
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗大鼠IL-1β/IL-1F2抗体包被于微孔板上，样品
和标准品中的大鼠IL-1β/IL-1F2会与固定在板上的抗体结合，游离的成分被洗去；接着
加入生物素化的抗大鼠IL-1β/IL-1F2检测抗体进行孵育，洗涤去除未结合的物质后，加
入链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶（Streptavidin-HRP）孵育。洗涤去除未结合的试
剂后，加入TMB底物溶液（显色剂）。溶液颜色与结合的目标蛋白成正比；加入终止液；
用酶标仪测定吸光度。
B. 检测局限
 仅供科研使用，不可用于体外诊断；
 该试剂盒适用于细胞培养上清样本和大鼠血清样本；
 请在试剂盒有效期内使用；
 不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用；
 样本值若大于标准曲线的最高值，应将样本用标准品稀释液（1×）稀释后重新检测；
 检测结果的不同可由多种因素引起，包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗
板技术、反应时间或温度、试剂盒的效期等。

B. 回收率
在细胞培养基样本中掺入检测范围内不同水平的大鼠 IL-1β/IL-1F2，测定其回收率。回
收率范围在 83.5-109.8%，平均回收率在 97.2%。
在大鼠血清样本中掺入检测范围内不同水平的大鼠IL-1β/IL-1F2，测定其回收率。回收
率范围在94.9-112.7%，平均回收率在106.3%。
C. 灵敏度
大鼠IL-1β/IL-1F2的最低可测剂量（MDD）一般小于9.77 pg/mL。
MDD是根据20个重复的零标准品孔的吸光度值的平均值加两倍标准差计算得到的相对
应浓度。
D. 校正
此ELISA试剂盒经由R&D Systems生产的大肠杆菌表达的高纯度重组大鼠IL-1β/IL-1F2
蛋白所校正。

F. 样本预值
大鼠血清样本 - 使用本试剂盒检测了4份大鼠血清样本中大鼠IL-1β/IL-1F2的水平。所
有样本的检测值均低于大鼠IL-1β/IL-1F2最低标准品，31.3 pg/mL。
G. 特异性
将以下因子配制成50 ng/mL的浓度来检测没有观察到明显的交叉反应或干扰。
Recombinant rat Recombinant human Recombinant porcine
IL-1 RI IL-1α IL-1α
IL-1β IL-1rα
Recombinant mouse IL-1 RI IL-1β
IL-1rα IL-1 RII
IL-1 RAcP/Fc Chinera
IL-1 Rrp2/Fc Chinera
含12.5 ng/mL重组小鼠IL-1β/IL-1F2的样品检测值为99.6 pg/mL (0.79%的交叉反应性)。
含50 ng/mL重组小鼠IL-1 RI的样品无交叉反应，但会使大鼠IL-1β/IL-1F2检测值从2
ng/mL降至1.2 ng/mL (下降40%)。