产品信息

产品名称	产品编号	规格	储存
2×Super CanaceTM High-Fidelity Mix for Library Amplification 2×Super CanaceTM High-Fidelity Mix for Library Amplification	12620ES03 12620ES08	1 mL 5×1 mL	-20ºC -20ºC

产品描述
    2×Super Canace^TM High-Fidelity Mix for Library Amplification是即用型2×预混合溶液，包含High-Fidelity DNA Polymerase（保真度是普通pfu DNA聚合酶的6倍，扩增速度达15 sec/kb），dNTP以及针对高通量测序文库扩增而精心优化的缓冲体系，具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。进行文库扩增反应时，体系只需加入引物和模板即可，简化了实验操作步骤，减少了人为误差，提高了实验通量和结果的重复性。此外，本产品还含有特异保护剂，使得预混液反复冻融后仍可维持稳定活性。

    本产品已与Hieff NGS^TM Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module（Cat#12608），Hieff NGS^TM Fast-Pace DNA Ligation Module（Cat#12607）共同用于DNA文库构建，通过Illumina^®高通量平台测序验证其有效性。本产品中提供的所有试剂组分均经过严格质检，最高程度保障产品优异性能与批间稳定性。

产品应用
基因克隆；复杂DNA模板扩增；高通量建库扩增。
质量控制
核酸外切酶残留检测：20 μL本品和0.6 μg λDNA -HindIII，37℃下孵育4 h，DNA的电泳谱带无变化。
核酸内切酶残留检测：20 μL本品和1 μg λDNA，37℃温育4 h，DNA的电泳谱带无变化。
大肠杆菌残留DNA检测：50 μL体系中，加入25 μL本品，以无菌ddH₂O为模板，扩增E.coil 16s rDNA 基因。30个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，无扩增条带。

运输与保存方法
冰袋运输。-20ºC保存。

注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。  
文库扩增反应体系（冰上配制）
1. 将表1中试剂解冻后颠倒混匀，置于冰上备用。
2. 于无菌PCR管中配制表1所示反应体系。
表1 PCR扩增反应体系

名称	体积（μL）
2×Super CanaceTM High-Fidelity Mix	25
Primer 1	2.5
Primer 2	2.5
Adapter Ligated DNA	20

3. 使用移液器轻轻吹打或振荡混匀，并短暂离心将反应液收集至管底。
4. 将PCR管置于PCR仪中，设置表2所示反应程序，进行PCR扩增。
表2 PCR扩增反应程序

温度	时间	循环数
98°C	1 min	1
98°C	10 sec	1~15（根据实验要求）
60°C	30 sec
72°C	30 sec
72°C	5 min	1
4°C	Hold	-

应用实例
使用2×Super Canace^TM高保真文库扩增预混液扩增不同GC含量（%）的DNA模板。DNA模板为3种Amplicon library，GC含量分别为38%、50%、70%。扩增循环数设置为12 cycles。PCR结束后使用1.0×磁珠（Yeasen Cat#：12601）纯化，21 μL洗脱，取1 μL进行浓度测定。
表3 Amplicon library扩增体系

名称	体积（μL）
2×Super CanaceTM High-Fidelity Mix	25
Primer 1 (10 μM)	2.5
Primer 2 (10 μM)	2.5
Amplicon library (0.05 ng/μL)	20

 
表4 Amplicon library扩增产量

GC%	平均产量（ng/μL）
38	26.36
50	17.93
70	17.25

HB170821