低密度脂蛋白胆固醇(Low Density Lipoprotein Cholesterol,LDL-C)是在血浆中由极低密度脂蛋白转变而来,主要在血管内合成,是运输胆固醇到肝外组织的主要运载工具。低密度脂蛋白胆固醇可促使动脉壁形成动脉粥样斑块,是动脉粥样硬化的危险因素。
胆固醇检测4款相关产品如下:
产品货号 | 60723ES | 60724ES | 60736ES | 60737ES |
产品名称 | 胆固醇(TC)含量检测试剂盒 | 游离胆固醇(FC)含量检测试剂盒 | 低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量检测试剂盒 | 高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量检测试剂盒 |
功能 | 检测总胆固醇含量 | 检测游离胆固醇含量 | 检测低密度脂蛋白胆固醇含量 | 检测高密度脂蛋白胆固醇含量 |
适用场景 | 血清、血浆、细胞、组织等样本中的总胆固醇含量测定,与心脑血管疾病以及多种病理状态密切相关。 | 用于检测血清、血浆、动物组织样本中的游离胆固醇含量。 | 用于动脉粥样硬化的辅助诊断和治疗,评估心血管健康状况和预防心血管疾病。 | 用于体外定量测定血清或血浆中的高密度脂蛋白胆固醇,有助于评估心血管健康状况。 |
储存条件
2~8℃避光保存,有效期12个月。
使用说明
- 样品处理
1)血清/血浆样本:直接测定,如超过线性范围用生理盐水稀释后测定。
2)组织样本:准确称取组织重量,按重量(g):体积(mL)=1:9的比例,加入9倍体积的匀浆介质,冰水浴条件下机械匀浆,2500转/分,离心10分钟,取上清液待测。【注:如组织样本为非高脂样本,匀浆介质统一用PBS缓冲液(0.1 mol/L,pH 7.4,60158ES)或生理盐水进行提取;如组织样本为高脂样本或部分为高脂样本,匀浆介质可统一用无水乙醇进行提取。】
3)培养液样本:吸取培养液,1000转/分钟,离心10分钟,取上清液测定。
4)细胞样本:
a细胞收集:将制备好的细胞悬液取出,1000转/分,离心10分钟,弃上清液,留细胞沉淀;推荐用PBS缓冲液(0.1 mol/L,pH 7.4,60158ES)清洗1-2次;1000转/分,离心10分钟,弃上清液,留细胞沉淀。
b细胞破碎:加入0.2-0.3 mL的匀浆介质(60158ES PBS缓冲液或生理盐水)进行匀浆,冰水浴条件下超声破碎或手动匀浆,制备好的匀浆液不离心直接测定。也可采用裂解液裂解,裂解好的液体不离心直接测定。【注:一般建议细胞密度在100万个/mL以上,破碎好的液体可显微镜观察细胞是否破碎完全。】
- 操作步骤
【注:正式测定前建议取2-3个预期差异较大的样本做预测定。】
1)酶标仪预热30分钟以上,调节波长至600 nm,蒸馏水调零。
2)按操作表依次加入各试剂。
96孔板操作,酶标仪比色 | |||
| 空白孔 | 校准孔 | 样本孔 |
蒸馏水(μL) | 2.5 |
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校准品(μL) |
| 2.5 |
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样本(μL) |
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| 2.5 |
试剂一(μL) | 180 | 180 | 180 |
轻轻振荡孔板混匀,37℃孵育5分钟,波长600 nm,酶标仪测定各孔吸光度值A1 | |||
试剂二(μL) | 60 | 60 | 60 |
轻轻振荡混匀,37℃孵育5分钟,波长600 nm,酶标仪测定各孔吸光度值A2,计算△A=A2-A1 |
- 计算公式
1)血清等液体样本计算公式:
LDL-C含量(mmol/L)=(△A样本-△A空白)÷(△A标准-△A空白)xC标准品
2)组织、细胞样本计算公式:
(1)匀浆介质用PBS缓冲液/生理盐水(此方法需单独测定匀浆液蛋白浓度)
LDL-C 含量(mmol/gprot)=(△A样本-△A 空白)÷(△A 标准-△A 空白)xC标准品÷ Cpr
C标准品:标准液浓度,mmol/L;Cpr:匀浆液蛋白浓度,gprot/L
(2)匀浆介质用无水乙醇(此方法不需要测定匀浆液蛋白浓度)
LDL-C含量(mmol/g组织)=(△A样本-△A空白)÷(△A标准-△A空白)xC标准品 ÷(W÷V样总)
C标准品:标准液浓度,mmol/L;W:样本质量,g;V样总:匀浆液总体积,L【注:细胞样本测定时可将(W÷V样总)替换为细胞前处理时的细胞密度。】
注意事项
- 样品含量如超出检测范围上限时,可用生理盐水稀释样本后进行测定,测定结果乘以稀释倍数;如样品含量较低也可以适当加大进样量(如5 μL或10 μL),同时要将标准品稀释相应的倍数后和样本保持相同的加样量。
- 该试剂需注意防止含有葡萄糖、胆固醇等试剂的污染。
- 开启后2~8℃可稳定保存1个月。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 本产品仅作科研用途!
Ver.CN20240430