单组份pNPP显色剂
使用说明书
1. 简介
本试剂单组份pNPP显色液为可溶性底物,用于以碱性磷酸酶(AP)为标记物的ELISA实验。主要成份是pNPP。在碱性磷酸酶的作用下,pNPP磷酸基团被切除,生成黄色可溶性产物,可在405nm测定,使用3M的NaOH可以终止反应。
2. 反应原理
在碱性条件下,AP酶催化pNPP脱除磷酸基团,生成肉眼可见的黄色产物对硝基酚,其在405nm处有最大吸收峰。
对硝基酚在pH 9.5条件下的光吸收峰:
使用单波长测定时,推荐使用405nm条件;使用双波长测定时,推荐使用405/620nm条件。终止液不改变吸收峰形态。
3.产品系列
货号 | 动力学灵敏度 | 包装规格 |
pNPP-A | 高——推荐定性产品使用 | 500mL、1000mL |
pNPP-B | 中——推荐定量产品使用 | 500mL、1000mL |
本试剂最佳储存条件为2~8℃密封避光保存,在该条件下储存有效期可以得到保证。
在长期储存过程中,试剂可能会因为自发衰变使得本底略微增加。如果在室温保存,这种自发衰变发生的速度会加快。尽量避免在室温条件下长期保存。
超过储存有效期的试剂仍然具备使用功能,但有产品使用性能降低的风险,本底也会有一定增加,用户在使用过期试剂时,应避免使用到下游产品中。
存储容器受到污染或发生破裂、渗漏、密封不严时,试剂应视为失效,即使即刻测定时性能良好,也会显著增加储存功能得不到保证的风险,遇到上述情况时,试剂应放弃使用到试剂盒中。
短时间的室温条件运输并不会影响试剂的性能,但应避免在温度超过30℃以上的环境中运输,室温条件下的运输以不超过7天为宜。
6. 工业用户使用注意事项:
ª 极重要:任何情况下禁止金属部件接触到试剂,推荐全部的管路系统使用硅胶软管;
ª 极重要: 禁止在分装酶结合物的房间及与之连通的房间分装该显色剂,应当单独设置隔离的房间;
ª 灌装应当在洁净车间内操作,操作间不能有日光直接照射;
ª 管路系统、试剂瓶使用纯水清洗干燥,不得有毛发、灰尘颗粒等残留在容器内壁;
ª 禁止裸手接触试剂,裸手直接接触试剂将极大增加污染风险,推荐使用无粉乳胶手套并戴口罩;
ª 灌装后尽快密封试剂瓶,以降低灰尘和光线造成的潜在危害;
ª 使用避光的试剂瓶,推荐材质为HDPE或PP。
7. 终端用户使用方法及注意事项
7.1 使用方法
在酶标板二抗孵育完成最终洗板后,根据实验习惯,加入本品100uL-200uL(通常加入100uL),按预设条件在室温或者37℃条件下温育结束后加入终止液,在酶标仪405nm或双波长405/620nm条件下读数。请在规定的有效期内使用,超过有效期的试剂仍然具备使用功能,但有产品使用性能降低的风险。
7.2 注意事项
ª 禁止将枪头直接插入瓶中取液,每次使用应倒出需要量,未用完的试剂禁止倒回试剂瓶内;
ª 禁止长时间敞口暴露在使用环境中;用后及时密封,于2~8℃储存;
ª 仅供专业人士使用,禁止应用到食品中。防止误饮。
显色强度可根据实际需要定制调整
货期短、价格低、性能稳定