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仅供科研使用，不得用于临床检验。
使用前，请务必仔细阅读说明书，如有不清楚的，请拨打24h技术支持专线：0714-6338558或18171667592/18108699172，咨询清楚再进行实验。
【产品名称】
通用名称：猪细小病毒抗体检测试剂盒（ELISA）
英文名称：Test Kit for Antibodies to Porcine Parvovirus（ELISA）
【包装规格】
48T/盒，96T/盒
【预期用途】
本试剂用于检测猪血清中细小病毒抗体，可用于猪细小病毒抗体疫苗免疫效果评价。
【检验原理】
本试剂盒采用酶联免疫吸附试验（ELISA）。在预包被猪细小病毒抗体抗原（固相抗原，货号：INS0010010C）的微孔酶标板中，加入猪细小病毒抗体阴阳性对照（货号：INS0010010J）和待测样本，温育洗涤，再加入另一株HRP标记的酶标抗体（酶标抗体，货号：INS0010010E），经过温育与充分洗涤，去除未结合的组分，在微孔板固相表面形成固相抗原-抗体-酶标抗体的夹心复合物。加底物A和B，底物在HRP催化下，产生蓝色产物，在终止液（2M 硫酸）作用下，最终转化为黄色，在酶标仪上测定吸光度（OD值），吸光度（OD值）与待测样品中猪细小病毒抗体的浓度正相关，通过测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有猪细小病毒抗体。
【检验方法】
试剂准备
1、使用前，所有的组分都要至少复温2h，确保充分复温到室温。
2、浓缩洗涤液：从冰箱取出的浓缩洗涤液，会有结晶产生，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解。浓缩洗涤液与蒸馏水，按1:20稀释，即1份的浓缩洗涤液，添加19份的蒸馏水。
3、底物：底物液A和B，在使用前，按1:1体积充分混合，混合后10分钟内使用。
操作程序
1、所有试剂和组分都先恢复到室温，标准品、质控品和样品，建议做复孔。
2、按前面试剂准备中描述的方法，配制好试剂盒各种组分的工作液。
3、从铝箔袋中取出所需板条，剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。
4、设置阴阳性对照孔、样本孔，阴阳性对照孔各加对照品100μL，样本孔加稀释后样本100μL。
5、用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
6、揭开封板膜，弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置20s，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复4次（共洗板5次）。若使用自动洗板机，请按洗板机操作程序进行洗板，添加浸泡20s的程序，可以提高检测的精度。洗板结束，加底物前，要在干净不掉屑的纸上，充分拍干反应板。
7、所有孔加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体100μL。
8、用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
8、揭开封板膜，弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置20s，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复4次（共洗板5次）。若使用自动洗板机，请按洗板机操作程序进行洗板，添加浸泡20s的程序，可以提高检测的精度。洗板结束，加底物前，要在干净不掉屑的纸上，充分拍干反应板。
9、将底物A和B按1:1体积充分混合，所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱温育10min。
10、每孔加终止液50μl，混匀，于450nm(可用630nm作参比波长）测定各孔吸光值（A值），无参比波长用空白孔调零(即所有孔吸光值减去空白孔吸光值)。
【参考值】
实验正常的情况下，阴性对照≤0.12，阳性对照≥0.58。
【检验结果的解释】
1.样品A值≥0.37为阳性；样品A值在0.2到0.37之间为可疑；样品A值＜0.2为阴性。
2.本实验结果为阴性或可疑时表明猪只抗体水平不足，建议补打相应疫苗。
