产品货号 | 产品名称 | 规格 |
6760603R | AlphaScreen GST Detection Kit | GST 50K PTS |
这款试剂盒可应用于:
- 蛋白质 - 蛋白质相互作用分析;
- 蛋白质 - 多肽相互作用分析;
- GST 标记蛋白的检测和定量;
- 蛋白质表达;
- 结合活性研究。
在典型的 AlphaScreen®分析中,感兴趣的生物分子被生物素化并与链霉亲和素包被的供体珠子结合。另一种生物分子带有 GST 标签,并与 AlphaScreen® 抗 GST 受体珠子结合。如果这两种生物分子相互结合,供体和受体珠子就会靠近。激发供体珠子会导致单线态氧的释放,单线态氧扩散并在受体珠子靠近时触发其发光。光的量与相互作用的程度成正比。使用试剂盒中提供的生物素化 GST 探针也可以进行竞争形式的分析。
AlphaScreen® 和 AlphaLISA™是基于珠子的分析技术,用于以微孔板形式研究生物分子相互作用。首字母缩略词 “Alpha” 代表放大的发光邻近均相分析。顾名思义,这些技术的一些关键特征为它们是非放射性的均相分析。捕获在珠子上的分子结合会导致能量从一个珠子转移到另一个珠子,最终产生发光/荧光信号。要理解信号是如何产生的,必须首先了解珠子。AlphaScreen® 和 AlphaLISA™分析需要两种珠子类型:供体珠子和受体珠子。每种珠子类型都含有不同的专有的化学混合物,这是 AlphaScreen® 技术的关键要素。供体珠子含有光敏剂酞菁,在680nm 光照下,它将环境中的氧气转化为激发态和活性形式的 O2,即单线态氧。请注意,单线态氧不是自由基;它是具有单个激发电子的分子氧。像其他激发分子一样,单线态氧在回到基态之前具有有限的寿命。在其 4 微秒的半衰期内,单线态氧在溶液中可以扩散约 200 纳米。如果受体珠子在这个邻近范围内,能量就会从单线态氧转移到受体珠子内的噻嗯衍生物中,随后在 520 - 620nm(AlphaScreen)或 615nm(AlphaLISA)处产生光。在没有受体珠子的情况下,单线态氧回到基态,不会产生信号。这种依赖于邻近度的化学能量转移是 AlphaScreen 均相性质的基础。