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与传统ELISA试剂盒相比，在实验时间节省至少1小时的同时，获得更加灵敏和精确的实验结果。Elabscience 自主开发的新技术，旨在帮助客户以更为高效的方式进行科学研究。
用途
该试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆、尿液、唾液中IgG浓度。其它相关生物液体可咨询技术支持。
灵敏度、检测范围、特异性和重复性
●灵敏度：0.64ng/mL。
●检测范围：1.56-100ng/mL。
●特异性：可检测人IgG，且与其它类似物无明显交叉反应。
●重复性：板内，板间变异系数均<10%。
背景介绍
免疫球蛋白G（IgG）是一种存在于所有体液中的免疫球蛋白。它们是体内最小但最常见的抗体(75%到80%)。IgG抗体是由4个肽链组成的大分子，约150 kDa，它包含2个相同的约50 kDa的γ重链，和两个相同的约25kDa的轻链，由此形成一个四聚体的结构。IgG抗体在对抗细菌和病毒感染方面非常重要,而且是唯一一种能够通过孕妇胎盘帮助胎儿的抗体。如果机体有特定的症状，IgG的测量可以作为诊断某些疾病的工具，如自身免疫性肝炎。在临床上，检测到的IgG抗体水平通常被认为是个体对特定病原体的免疫状态的指示物。这一做法的一个常见例子是，为了证明对麻疹、腮腺炎和风疹(MMR)、乙型肝炎病毒和水痘等的血清学免疫力而绘制的滴度图。
检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人IgG抗体包被于酶标板上，实验时样品（或标准品）及生物素化的抗人IgG抗体同时加入酶标板中，样本（或标准品）中的人IgG会与包被抗体结合，同时抗人IgG抗体与结合在包被抗体上的人IgG结合，游离的成分被洗去。再加入辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，IgG浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中IgG的浓度。
典型数据
以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| 浓度： ng/mL | 100 | 50 | 25 | 12.5 | 6.25 | 3.13 | 1.56 | 0 |
| OD | 2.716 | 2.131 | 1.540 | 0.990 | 0.597 | 0.361 | 0.246 | 0.118 |
| 校正OD | 2.598 | 2.013 | 1.422 | 0.872 | 0.479 | 0.243 | 0.128 | - |
样本值
血清/血浆/尿液/唾液- 对健康志愿者的样本进行实验分析。
| 样本类型 | 范围 | 推荐稀释比例 |
| 血清（n=12） | 2.99-28.02mg/mL | 2×105-2×106 |
| 血浆(EDTA)（n=12） | 6.4-15.3mg/mL | 5×105-2×106 |
| 唾液（n=12） | ND-20807ng/mL | 1-2000 |
| 尿液（n=12） | ND-1138ng/mL | 1-100 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| 批内变异系数 | 批间变异系数 | |||||
| 样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 数量 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| 平均值( MERGEFIELD 单位ng/mL) | 4.70 | 12.50 | 69.89 | 5.10 | 11.50 | 65.66 |
| 标准差 | 0.30 | 0.60 | 4.75 | 0.30 | 0.50 | 4.17 |
| 变异系数 (%) | 6.38 | 4.80 | 6.80 | 5.88 | 4.35 | 6.35 |
回收率
分别往不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| 样本类型 | 回收率范围 (%) | 平均回收率 (%) |
| 血清(n=12) | 87-114 | 103 |
| 血浆(EDTA) (n=12) | 86-107 | 97 |
| 唾液（n=12） | 76-103 | 85 |
| 尿液（n=12） | 75-122 | 90 |
线性
分别往4个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将4个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| 血清(n=4) | 血浆(EDTA) (n=4) | 唾液(n=4) | 尿液（n=4） | ||
| 1:2 | 回收率范围(%) | 79-97 | 87-128 | 90-123 | 80-118 |
| 平均回收率(%) | 87 | 106 | 109 | 107 | |
| 1:4 | 回收率范围(%) | 91-111 | 81-94 | 94-113 | 97-127 |
| 平均回收率(%) | 99 | 87 | 103 | 110 | |
| 1:8 | 回收率范围(%) | 99-118 | 82-96 | 84-117 | 107-115 |
| 平均回收率(%) | 104 | 90 | 105 | 112 | |
| 1:16 | 回收率范围(%) | 106-118 | 85-114 | 90-125 | 107-115 |
| 平均回收率(%) | 112 | 100 | 110 | 112 |
试剂盒组成及保存
未拆封的试剂盒可在2-8℃保存6个月；试剂盒组分开封后请按照下表中的条件分别保存。
| 中文名称 | 规格 | 开封后保存条件 |
| ELISA 酶标板 | 8 孔×12 条 | 2-8℃, 可存放1个月 |
| 冻干标准品 | 2 支 | 2-8℃，复溶后当天使用 |
| 标准品&样品稀释 | 1瓶 20mL | 2-8℃ |
| 生物素化抗体工作液 | 1瓶 12mL | |
| 酶结合物稀释液 | 1瓶 14mL | |
| 浓缩洗涤液 | 1瓶 30mL | |
| 浓缩HRP酶结合物（100×） | 1支 120μL | 2-8℃(避光) |
| 底物溶液(TMB) | 1瓶 10mL | |
| 反应终止液 | 1瓶 10mL | 2-8℃ |
| 封板覆膜 | 5张 | |
| 产品说明书 | 1 份 | |
| 质检报告 | 1 份 |
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些，请在使用时量取而非直接倒出。
