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- 迅速地 -浓缩溶解缓冲区可直接在介质中进行细胞在井内溶解,从而加速工作流程。
- 同型特异性 -高特异性重组KRA抗体检测激活的人类KRA,而不交叉反应。
- 可使用HTP -提供多余的试剂,使其能够用于试剂储存器或自动化微板清洗器。
- 多才多艺的 -使用浓缩的溶解缓冲器来进行井内的溶解工作流,或稀释溶解缓冲器,用于清洗细胞。额外的5x溶解绑定缓冲区单独可用。
- 假设输入 -用2x10 4 - 32 x 10 4 每一口井的种子细胞或5-50G全细胞提取物。
KRAS-WERS试剂盒采用的是只结合激活(GTP结合)RAS蛋白的RAS结合域的独特结合特性。一种GST-聚变蛋白首先被结合在96井的谷胱甘肽包膜板上。含有活性RAS的细胞可以直接在培养井中使用浓缩的5x溶解缓冲区分解,然后直接转移到只激活RAS结合到GST-RBC的酶联免疫吸附板上。结合激活的克拉斯被检测到与一个主要抗体,是高度特异的克拉斯异形。加入次级抗体结合辣根过氧化物酶(HRP),然后加入发展溶液提供了敏感的化学发光读数,易于量化发光。
背景
小的GTP酶RAS蛋白结合并水解GTP,使其作为分子开关,在活性(GTP约束)和非活性(GDP约束)状态之间循环。该开关调节涉及细胞功能的信号转导途径,包括增殖、分化和凋亡。RAS蛋白以三种主要的同型存在:人力资源分析、自然资源分析和KRAS,每一种都含有大约190种氨基酸,这些氨基酸具有80-90%的序列相同性。RAS是癌症中最常见的突变基因之一。由于核苷酸快速交换和(或)间隙(GTP酶激活蛋白)损伤,在KRA、KRA和HRA的第12、13和61个密码子上促进癌发集群的功能性误区突变导致GTP结合增强。尽管RAS突变都是激活的,但它们在不同组织中的致癌电位和频率各不相同,KRA突变最为普遍。由于大多数研究人员都在寻找异形特异性疗法,因此设计了高特异性的KRA异形治疗试剂盒。
Active Motif 生产一系列高质量，全长的表观修饰酶和底物用于药物研发。
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KRAS In-well Lysis ELISA Kit (activemotif.com) Active Motif公司是一家致力于研发和生产核细分子生物学和表观遗传学研究用试剂的专业公司，也是世界著名的转录因子试剂生产商和CHIP-seq外包服务供应商。
Active Motif的产品涉及：表观遗传学相关抗体、Chip级别抗体、重组识别子和催化酶、预甲基化修饰的重组组蛋白、多聚核小体和生物素标记核小体；以及各类染色质分析、转录因子表达调控分析和DNA甲基化分析的试剂盒等。
