一、产品简介
人CD3/CD28激活磁珠 ,本产品用于激活人T细胞,促进T细胞增值和T细胞分化。该产品利用三维立体磁珠模拟抗原呈递细胞对T细胞的激活,ActBeads™ 提供的第一信号(CD3)和第二信号(CD28)使得T细胞高效扩增,避免T耗竭。
• ActBeads™ 激活磁珠浓度为4x107个/mL
• 磁珠粒径均一,流式细胞仪分析时可与T细胞明显区分
二、试剂盒组分
产品名称 | 存储条件 | 缓冲液成分 | 功能 |
ActBeads™ Human CD3/CD28 Activator | 4°C保存,避免冷冻 | PBS, 0.1% BSA | 通过磁珠偶联的CD3/CD28抗体激活T细胞,促进T细胞增值和分化 |
BSA - bovine serum albumin; PBS - phosphate-buffered saline
运输条件: 4°C运输
三、培养条件
- 缓冲液:RPMI1640 培养基+10% FBS + 2 mM L-Glutamine+100 U/mL penicillin/streptomycin
- 细胞因子:人IL2细胞因子
温馨提示
- T细胞分离时,确保FACS Buffer渗透压稳定,免疫细胞对渗透压非常敏感
- IL7、IL15可与IL2联合使用,促进T细胞增值
四、激活或者扩增T细胞
步骤 | 说明 |
1 | 分离人T细胞,将其铺到96孔平底培养板中,细胞密度为8 x 104/孔,培养基200 μL |
2 | ActBeads™ 人CD3/CD28激活磁珠震荡混匀后,加入到细胞中,2 μL/孔 Note: 激活或扩增T细胞时,ActBeads TM和细胞比例为1:1;诱导Treg细胞分化时,磁珠和细胞的比例应增加到2:1 |
3 | 加入IL2细胞因子,终浓度为100 U/mL |
4 | 二氧化碳细胞培养箱进行T细胞培养,5% 二氧化碳,37℃ |
5 | 培养48小时后,T细胞体积变大,形态多样 |
6 | 当细胞密度较大时,更换新鲜培养基或者将细胞转移至新的培养板 |
T细胞重新刺激
通常T细胞在扩增到第7-10天时,需要通过添加新鲜的ActBeads™ 和IL-2进行多次重新刺激。经过反复重新刺激后,CD8+ T细胞仍保持细胞毒性。
步骤 | 说明 |
1 | 将T细胞重悬后置于无菌离心管中,在磁力架上吸附2分钟 |
2 | 倒出/吸出T细胞,进行细胞计数 |
3 | 将T细胞重新铺到培养板中,密度0.5–1 × 106 cells/mL |
4 | 二氧化碳细胞培养箱培养,5% 二氧化碳,37℃ |
数据展示
如图:采用Immuno-X系列产品分离PBMC中的CD3 T 细胞并进行体外培养。(A)采用(#SN3101)分离健康人PBMC中CD3 T细胞,采用CD3的流式抗体进行染色,分选后的CD3 T细胞纯度高达98.7%。(B)通过CFSE荧光染料标记CD3 T 细胞,再采用人原代T细胞激活磁珠(#AH2001)刺激,3天后进行流式分析,可以观察到良好的T细胞增值。
人CD3/CD28激活磁珠 ——英诺思生物代理———北京百奥创新科技有限公司,欢迎咨询选购。
作为一家专注于免疫学、细胞生物学、分子生物学等领域核心试剂产品的研发、生产与销售的高新企业。北京百奥创新科技有限公司是中关村高新技术企业,于2017年在北京成立。百奥创新依托于中科院的科研技术力量,以中科院资深科学家为核心,整合经验丰富的商业团队及管理团队组建而成。百奥创新在产品自主研发的同时,也与全球多家生命科学试剂供应商建立良好的合作关系,基于“客户第一”的核心理念,向全国10000+客户提供20000+优质产品。百奥创新将以品质树立品牌,以服务赢得口碑,致力于成长为重要的生物原料及生物化学试剂开发与成果转化的kai tuo zhe,并成为行业ling xian的优质供应商。