丁基硫疏水层析介质(Butyl-S-QZT 6FF)
1.概述
作为一类常规疏水层析介质,Butyl-S-QZT 6FF可应用于蛋白纯化和复性的诸多领域。该介质以高度交联琼脂糖为基质,流速快,机械性能良好,适合大规模工业生产中使用。介质具有极佳的化学稳定性,耐酸、碱、有机溶剂性能强。可用1MNaOH溶液在位清洗。配基密度可控,可依据目标蛋白体系性质提供对应疏水性质的介质。层析效果良好,蛋白活性回收率和纯度均达到或超过国际同类产品。
2.Butyl-S-QZT 6FF的理化性质
本中心研发生产的Butyl-S-QZT 6FF介质粒径均一,性能稳定,其理化性质如下:
表1 Butyl-S-QZT 6FF性能参数
介质 | 配基 | 粒径 (μm) | pH稳定范围 | 最快流速 (cm/h) | |
工作 | 清洗 | ||||
Butyl-S-QZT 6FF | 正丁基 | 45-165 | 3-13 | 2-14 | 750 |
3.Butyl-S-QZT 6FF的应用
作为纯化重组乙肝病毒表面抗原(r-HBsAg)的专用疏水层析介质,Butyl-S-QZT 6FF具有粒径均一、机械强度高、配基密度可控等优点,用于纯化分别由CHO细胞表达和酵母细胞表达的r-HBsAg,纯化效果良好。由于具有上述优点,本中心研发生产的Butyl-S-QZT 6FF已被生化工程国家重点实验室、珠海健康元生物医药公司等单位广泛使用,获得了较高的评价。
3.1 用于CHO细胞表达r-HBsAg分离纯化
将疏水介质Butyl-S-QZT 6FF用于纯化CHO细胞体系表达r-HBsAg。柱子规格:(I.D.1.6cm×5cm),流速2mL/min。
3.2 用于酵母细胞表达HBsAg分离纯化
将疏水介质Butyl-S-QZT 6FF用于分离酵母细胞体系表达乙肝疫苗表面抗原,系酵母CD液直接疏水层析。柱子规格:(I.D.1.6cm×5cm),流速2mL/min。疫苗活性回收率为90%左右,单步纯化倍数3。将酵母提取液经离子交换层析后的活性组分进行疏水层析,疫苗活性回收率90%以上,纯化倍数11。