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德国LUXENDO LCS SPIM光片成像系统

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北京赛百奥科技有限公司
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德国LUXENDO LCS SPIM光片成像系统

名称:LCS SPIM光片成像系统:透明化大样品高速成像的理想方案
产品简介:

LCS-SPIM为透明化样本成像提供了一种经济有效的解决方案。基于非常通用的布局,高度灵活的升级选项扩展了系统的性能,极大地提高了采集速度和光学性能。其紧凑、稳健和无振动设计保证长期高通量实验中最大的稳定性

品牌:德国 LUXENDO

 

LCS SPIM光片成像系统

 

透明化大样品高速成像的理想方案

 

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产品概述:

LCS-SPIM为透明化样本成像提供了一种经济有效的解决方案。基于非常通用的布局,高度灵活的升级选项扩展了系统的性能,极大地提高了采集速度和光学性能。其紧凑、稳健和无振动设计保证长期高通量实验中最大的稳定性。

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该系统的典型应用包括对大的透明化样品(例如整个小鼠大脑)进行成像,以显示完整的神经元和血管网络。透明化器官或厚组织样品的显微镜检查在发育生物学研究和癌症研究中具有高度相关性,例如在研究器官发育、肿瘤结构和肿瘤发生机制等。

 

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小鼠全脑(9mm×14mm×11mm),双色标记血管和细胞。样品由韩国IBRO Dr.Yum提供。

 

 

样品室:

LCS采用石英晶体反应杯,简化整个样品安装程序并且方便清洁和维护,同时可搭配机器人实现无人值守高通量扫描。只需简单的将样品放入充满透明化溶液中,专利压电电机,可编程光路,稳定的机身设计,XY方向扫描移动物镜,而非样品。这些设计确保即使没有防震台也能在高速成像期间避免样品振动,减少拼接误差。

可选择不同长度的石英样品杯(最大样品杯尺寸为40mm×20mm×20mm,还可根据用户情况定制特殊尺寸样品杯),有助于安放大型,环境敏感的样品。同时支持溶液和标本的折射率(Rl)范围从1.33到1.57,确保与各种透明化溶液的兼容性

 

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照明和检测:

多种可选择谱线的激光(详见参数表)通过用于长度和直径调整的光束整形器后扫描光束而产生光片。两个尼康4x数值孔径0.2的空气物镜从样品的相反方向投射出两个对齐的光片。

检测光路包括一个奥林巴斯4x数值孔径0.28的空气介质物镜,一个使总倍率在2×和8x的变倍器以及10孔高速滤色片转盘。稳健的sCMOS相机非常适合于需要高检测效率、高量化和高速度的实验。

 

快速成像模式:

独有TAGLENS技术,可以通过轴向光照扫描扩展视场(FOV)并减少阴影效应,并实现快速成像。

 

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没有使用TAGLENS,有效视野受限

 

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使用TAGLENS,照明光束沿X方向运动

 

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拓宽有效视野!

 

 

TAG lens-看树,也见森林

 

创意的在照明光路上使用可调式声光折射率透镜,提供高速轴向变焦能力,可有效扩展扫描视场并减少阴影效应。

※ 极高速扫描(70-100kHz)

※ 有效扩展物镜焦深

※ 无需机械装置进行自动聚焦

※ 解决传统高斯光片必须在光腰厚度和视野之间取舍的问题

※ 提高光束均匀度60%以上(取决于物镜NA值)

 

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未使用TAG lens(a)和使用TAGlens(b)在光片成像中的量化展示。对比发现使用TAG lens之后光片稍微变厚但是在整个视野中更加均匀。图片也展示了未使用TAG lens(c)和使用TAG Lens(d)之后使用包埋在琼脂中的荧光小球成像的实拍图片。所有图中使用的激光能量完全一致。比例尺为100um。

Duocastella, M., et al., Selectable light-sheet uniformity using tuned axial scanning.Microsc.Res.Tech.2017.

 

 

应用例图:

 

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成年大鼠脑室下区吻侧迁移流起始位置,标记pNestin,pDCX以及Lestin,样品由日本RIKEN Dr.Hama提供。

 

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透明化癌症微球,样品由日本国家癌症研究所Dr.Tajma提供。

 

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小鼠胚胎整体以及局部成像细节,样品由日本东北大学Dr.Susaki提供。

 

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小鼠肾部切块整体及局部成像,样品由日本东北大学Dr.Susaki提供。

 

LCS还可以通过同时旋转双侧激光入射角度,消除因为无法完全透明的组织部位引起的阴影,提高最终3D图像的均匀度和结果的准确性。

 

 

LCS参数表:

激光光源

最多可以连接6支激光,可选谱线有:405,445,488,515,532,561,594,642,以及685nm;

以上激光谱线功率均为入光纤前40mW;

激光MHz级高消光比高速调制。

照明光路

光路色差校对范围440-700nm;

通过线光束扫描方式产生光片,扫描速度随相机曝光时间自动调节;

双侧照明,激发光束直径可调,光片厚度5-28um;

两只照明用4X物镜,数值孔径:0.2;

可升级到TAG轴向照明扫描,扩展视场并减少阴影效应。

检测光路

4X物镜,数值孔径0.28,工作距离30mm,可对折射率范围1.33-1.57的标本进行检测;

3档定焦中间变倍器,放大系数分别为0.5x、1x和2x;

10档滤光片转轮,相邻切换时间50ms;

单张最大视野6600um×6600um;

有效分辨率1.1um@500nm;

成像速度:整个小鼠大脑约5分钟(12mm×12mm×12mm标本);

XY方向通过移动检测物镜实现,Z轴方向通过移动高精度压电式载物台实现,大程度减少扫描过程中样品的晃动和位移;

成像检测器:高速sCMOS相机,2048×2048像素,6.5um每像素,速度:80fps@2048×2048,峰值QE:82%;小视野高速度500fps;

两种曝光模式:全局曝光(global shutter)大程度收集荧光、减少荧光漂白和样品杀伤;和照明光路同步的卷帘门曝光(roling shutter)极大提高成像信噪比,曝光像素宽度可调。

样品池

可更换石英晶体反应杯,便于从上方进行样品安装和维护;

三种不同样品池尺寸:20mm×20mm×20mm、20mm×20mm×30mm和20mm×20mm×40mm(宽×高×长);另外可定制更大尺寸样品池。

高级成像工作站和软件系统

系统软件:

相机常规和线扫模式无缝切换,并可组合定义成像;

即视光层电动精调焦,包括位置,对焦,电动变倍控制;

样品多三维位置一键式定义,储存找回;

多颜色通道,多三维位置自由组合,多time-lapse控制;

嵌入式显微镜软件,配备开放式通讯接口;

开放式图形化界面控制和显微镜自动控制。

图像工作站:

HDF5通用等级化数据结构模式,适合海量科研大数据处理;

高端图形显卡Nvidia   GeForceRTX2080或更高,高速硬盘阵列,≥32TB存储空间;

Intel双8核CPU,≥128GB ECC内存;

4K显示器1台。


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