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- 细胞名称：L6565细胞（小鼠白血病克隆细胞系）
- 形态：淋巴母细胞样，悬浮生长
- 含量：>1x106 个/瓶
- 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
- 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
二、细胞接收后的处理：
1、贴壁细胞
- 收到T25方瓶细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们（冻存管细胞收到后直接37℃水浴复苏或直接放置于液氮中长期储存）。
- 请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
- 弃去T25瓶中的培养基，换用新鲜的完全培养基。
- 如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代。
- 接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。
- 收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
- 请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将15ml离心管置于37℃培养约2-3h。
- 1200rpm离心5min，弃去15ml离心管中的培养基，细胞沉淀用新鲜的完全培养基重悬并培养。
- 如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代。
- 接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
一、培养基及培养冻存条件准备：
- 准备H-DMEM培养基，90%；优质胎牛血清，10%。
- 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
- 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
- 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
- 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化2-3分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。
- 轻轻吹打后吸出，移入15ml离心管中，在1200RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加入1mL培养液后吹匀。
- 移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。
注意事项：
1. 收到冻存管细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
3. 细胞用途：仅供科研使用。
发货方式：
复苏后发货：我们复苏细胞后发货，货期一周左右，免运费。（气温较好建议复苏后发货）
冻存发货(干冰运输）：需额外增加干冰运费，选择干冰运输的我们发两管细胞，为了保证客户接种可靠性多发一管。（气温低于0℃须冻存发货）
细胞发货采取专业的运输包装，并选择最快捷的运输方式（顺丰速运或其他空运快递）
Virological characteristics and pathogenicity of culture supernatant of l6565 leukemia clonal cells
Purpose To study the virological and pathogenic characteristics in culture supernatant of murine L6565 clonal cells. Methods We studied the virological and biological characteristics of culture supernatant of murine L6565 clonal cells by XC assay,reverse transcriptase activity and NB tropic.The pathogenic characteristics of culture supernatant of murine L6565 clonal cells which was inoculated Subcutaneously into neonatal SSB strain mice. Results The culture supernatant of murine L6565 clonal cells showed positive with XC assay,reverstranscriptase activity and NB tropic test.This supernatant induced T lymphocytic leukemia/lymphoma(TL) and B lymphocytic leukemia/lymphoma(BL);the ultracentrifugal concentrated supernatant induced TL,BL and Granulocytic leukemia(GL). Conclusions There are murine leukemia viruses(MuLV) with NB tropic in the culture supernatant of murine L6565 clonal cells,which can induce TL and BL and GL on neonatal SSB strain mice.Progress in the study on establishment and characteristics of viral L6565 cell clone
A Review] The biological characteristics of viral L6565 leukemia cell clone were as follows: (1) The chromosome counts varied 38～114 , and stem cells were 42; (2) Virus particles type A and type C found in the cytoplasm of clone cells; (3) X-C assays were positive, c- myc and c- fos gene overexpressed in clone cells; (4) Differential markers CD4, CD8, CD45R were negative, CD45RO λ were positive; (5) The supernatant of clone cells could induce T or B lymphocytic leukemia/lymphoma and granulocytic leukemia in SSB strain mice. The leukemogenic effect of concentrate supernatant was stronger than non-concentrate supernatant( P 0.05); (6) The antisense of the c- myc gene induced low expression of c- myc protein, and inhibited the growth of viral L6565 clone cells.
