SERANA胎牛血清华南总代理

公司主营品牌和产品:
1.SERANA品牌，ZETA LIFE品牌，Biozellen品牌，GUNSTER（钢士特）品牌等。
2.血清类:澳洲源，新西兰源，美国源，南美源，热灭火牛血清，透析牛血清，超低Igg血清，活性炭处理血清，无外泌体血清，马血清，驴血清，牛血清，鸡血清，大鼠血清，小鼠血清，猪血清，豚鼠血清等。
SERANA提供的原料及成品是从无疫区采集的，血源主要来自澳大利亚，新西兰，本十等原料和成品。产品主要销往各生物制品生产企，和科研院所。
SERANA品牌产品的制造和生产在新的现代化生产实验室中进行。Serana品牌FBS精选天然无污染牧场，严格筛选而源，采用全封闭无菌穿刺采而技术，三重0.1无菌过滤标准，智能化工厂全自动超洁净生产。消除生物污染。已通过生理生化检测、细胞培养生长验证等检测。每批成品在出厂前都要经过严格的抽样和复检，努力将每一瓶优质产品交付给用户。目标是在价格和产品交付方面超越客户的期里!在广大用户的帮助和支持下，SERANA通过不懈的努力，已成为生命科学的优质供应商之一。同时，我们准时为各个地区提供优质的动物血清和细胞培养试剂!
中科腾宇（广州）科技技术有限公司为SERANA广东华南总代理，可联系咨询电话：13247571155（微信同号），QQ：2133177596
相关产品信息

品牌	货号(REF)	名称	规格
SERANA	FBS-AS50	优级胎牛血清Fetal bovine serum	50mlX10Tube
SERANA	FBS-AS100	优级胎牛血清Fetal bovine serum	100ML
SERANA	FBS-AS500	优级胎牛血清Fetal bovine serum	500ML
SERANA	FBS-UE50	特级胎牛血清Fetal bovine serum Premium	50mlX10Tube
SERANA	FBS-UE100	特级胎牛血清Fetal bovine serum Premium	100ML
SERANA	FBS-UE500	特级胎牛血清Fetal bovine serum Premium	500ML
SERANA	FBS-ESA50	ES级胎牛血清	50mlX10Tube
SERANA	FBS-ESA100	ES级胎牛血清	100ML
SERANA	FBS-ESA500	ES级胎牛血清	500ML
SERANA	FBS-NEWZ500	新西兰胎牛血清	500ml
SERANA	FBS-AUS500	澳洲胎牛血清	500ml
SERANA	FBS-AUS050	澳洲优等胎牛血清	500ml
SERANA	EXO-FBS-50S-1	无外泌体胎牛血清	50ML
SERANA	FBS-DU075	透析型胎牛血清（Dialyzed FBS）	500ML
SERANA	FBS-DT022	碳吸附胎牛血清Charcoal Stripped Charcoal Stripped ）	500ML
SERANA	FBS-SG500	超低IgG胎牛血清（LOW IGg FBS)	500ML
SERANA	FBS-HT500	热灭活胎牛血清（Heat-Inactivated）	500ML
SERANA	NCS-CN500	新生牛血清(Newborm Calf serum)	500ML
SERANA	CSF-WR500	小牛血清（Calf serum)	500ML
SERANA	HSF-UE500	马血清（Hores serum）	500ML
SERANA	CNF-UE100	鸡血清（Chicine serum)	100ML
SERANA	GSF-UE100	山羊血清（Goat serum）	100ML
SERANA	PSF-CN100	猪血清（Porcine serum）	100ML
SERANA	LVF-CC100	驴血清	100ML
SERANA	RAC100	兔血清	100ML
SERANA	BSA-AU-B500/1000	牛血清白蛋白（Bovine Serum Aoumin）	500G/1000g
SERANA	DSA-AC100	双抗	100ml
SERANA	YMA-AC-100	0.25%胰酶	100ml
SERANA	WXQA50	无血清冻存液	50ml
SERANA	WXQA100	无血清冻存液	100ml
SERANA	CCK500	CCK-8	500T

无菌操作基本技术
一实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow)以紫外灯照射30-60分钟灭菌，以70%ethanol 擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，目即使培养基相同亦不共享培养基。以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70% ethanol 擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后，再进行下一个细胞株之操作。

一，无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架，吸管吸取器或吸管盒等可 以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流之流通，实验用品以70%ethanol 擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在抬面之中央无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操作。

二，小`取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打 开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放詈卓面。

四.工作人员应注意自身之安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验，对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操
作，并选择活当笔级之无菌提作台(至少Class1)，提作过程中，应避免引起aerosol之产生，小心毒性药品，例如DMSOK
TPA等，并避免尖锐针头之伤害等。
五.定期检测下列项目:
1.CO2 钢瓶之CO2力
2.CO2 培养箱之CO2 浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水，每周更换)。
3.无菌操作台内之airflow 压力，定期更换紫外线灯管及HEPA过滤膜，预滤网(300小时/预滤网，3000 小时/HEPA)

六.水槽可添加消毒剂(Zephrin 1:750)，定期更换水槽的水。实验用品
1.种类:
1.细胞培养实验用品均为无菌，除了玻璃容器与pasteur pjpet 外，其它均为塑料无菌制品。

2.TC级培养盘表面均有coating 高分子物质以让细胞吸附，培养容器种类有Tflask，platesdishes.roller bottle 等，依实验需要使用。

3. plastic sterile pipet 1 ml.2 m.5 m.10m.25m
4.塑料离心管:15 ml,50ml，均有2种不同材质，其中polypropylene(PP)为不透明材质，polystyrene(PS)为透明材质，可依实验需要而选择适合材质之离心管。

5.qlass pastuer pipet9 inch，用以抽掉废弃培养液等

6.玻璃血清瓶(Pyrex or Duran glassware):100ml.250ml500 ml.1000 ml
2.清洗:
1.新购玻璃血清瓶先以0.1~0.05 N HCI 浸泡数小时，洗净后才开始使用。
2.用过之玻璃血清瓶，以高压蒸汽灭菌，洗净后分别用一次与二次去离子水冲洗干净，勿加清洁剂清洗

3.灭菌:
1.实验用玻璃血清瓶以铝箔纸包票瓶盖，高床蒸汽灭菌121 oC.151b.20 分钟，詈干oven中烘干
2.实验用玻璃pasteur pipet 以干热灭菌1700C4小时。
3.液体或是固体废弃物可用10 % hypochloride 溶液(次氯酸，即漂白水) 或是蒸汽高压灭菌121 oC.15 lb.20 分钟处理。

七.培养基
1.液体培养基贮存于4 0C 冰箱，避免光照，实验进行前放在37 oC 水槽中温热

2.液体培养基(加血清) 存放期为六个月，期间qlutamine 可能会分解，若细胞生长不佳，可以再添加适量qlutamine

3.粉末培养基配制(以1 升为例):
1.细胞培养基通常须添加10 % 血清，因此粉末培养基之配制体积为900ml，pH 为7.2-7.4。NaHCO3 为另外添加，若将 NaHCO3 粉末直接加入液体培养基中会造成pH 之误差，或局部过碱。因此粉末培养基及NaHCO3 粉末应分别溶解后才温合，然后用CO2气体调整pH，而非用强酸(HCl)或强碱(NaOH)，因为氯离子对细胞生长可能有影响，且贮存时培养基的pH易发生改变。
2.材料:
1.纯水(milli-Q 水或二次至三次蒸馏水，水品质非常重要
2.粉末培养基
3.NaHCO3(Sigma S-4019)
4.电磁搅拌器
5.无菌血清瓶
6.0.1或0.2 mm无菌过滤膜
7.pH meter
8.真空帮浦
9.CO2 气体
3.步骤:
1.取粉末培养基溶于700 ml milli-Q 水中，搅拌使其溶解
2.称取适量之NaHCO3 粉末(数量依培养基种类而异，表一)溶干200mlmili-Q水中，搅拌使其溶解，然后通入CO2气体至饱和，约3-5 分钟。
3.将溶解目含饱和CO2 之NaHCO3 溶液加入溶解之液体培养基中混合。混后溶液之0H应为7.2-7.4，除非oH 值偏差大大否则不需用酸碱再调整之。
若为太碱，可再通入CO2 气体调整pH。培养基以真空帮浦通过过滤膜时，H会升高0.1-0.2.
4.以0.1 或0.2 mm 无菌过滤膜过滤灭菌，同时分装至无菌容器中，标示培养基种类、日期、瓶号等，贮存于4 oC。(血清亦可加入培养基中一起过滤)
5.配制之培养基配制须作生长试验与污染测试
4.配制培养基之生长测试
1.材料:
1MDCKcel(ATCC CCL-34或CCRC 60004
2.6-well TC plate (or 35 mm TC dish)3 methanol
4. glacial acetic acid
5.10% Giemsa solution (GibcoBRL10092-013)
2.步骤:
1.以待测试培养基培养MDCKcell，接种MDCK细胞干6-well plate (或35mm TC dish)中，每个well接种1x102 活细胞.同时作对照组实验，
2.接种5~7 天后，在100 倍倒立显微镜作观察细胞群落之生长，待细胞群 落大到可以肉眼观察，而群落间不互相接触时即可。
3.去除培养基，加入1 ml Carnoy’s 固定液(甲醇:binq醋酸=3:1)，室温下静置10 min。
4.去除固定液，水洗二次。
5.加入1 ml 10 % Giemsa solution，，室温下静置染色2-3 min
6.去除染液，水洗二次。
7.以肉眼计数群落数，并比较之，若新配制或新批号的培养基对细胞生长不佳，则丢弃之。

八.抗生素
1.细胞库之细胞培养基不加抗生素
1.培养自ATCC 引进之细胞株，培养基中不加抗生素。
2.培养自其它实验室引进之细胞株，制作token freeze 前培养基须添加抗生素，待token freeze 通过污染测试后，大量培养时则不加抗生素，
2.寄送活细胞时，须将培养液充满整个flask 时，则须添加抗生素(penicillin 100 units/ml+streptomycin 100 ug/ml)
3.若要检测mvcoplasma，则培养基内不可添加gentamicin，因gentamicin 会抑制mycoplasma 生长。
4.去除细菌污染之抗生素混合配方:penicillin 250 units/ml.streptomycin 250 ua/ml.neomvcin 250 ua/ml. bacitracin 2.5 units/ml，注意混合使用后药物毒性会增强。
5.抗生素使用种类与浓度:工作浓度.储存温度.杀灭细菌 penicillin 100 units/ml -20°C G(+) bacteria
streptomycin 100 ua/ml-20°CG(+)and G(-) bacteria chlotetracvcline 50 ug/ml-20°CG(+)and G-)bacteria
gentamicin 50 uq/ml -20CG(+)and G(-)bacteriamycoplasma amphotericin B 2.5 ug/ml -20C veast and molds nystatin 50uq/ml -20 yeast and molds fungizone 2.5uq/ml-20C yeast and molds
九.血清
1.血清必须贮存千-20~-70oC，若存放干4 0C，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将40~45ml 分装干无荣50 ml 离心管中，由于血清结冻时体积会增加约10%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。
2.一般厂商提供之血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。
3.瓶装(500ml) 血清解冻步骡(逐步解冻法);-200C 或-700C至40C冰箱溶解一天，至室温下全溶后再分装，一般以50ml无菌离心管可分装40~45 ml，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。勿直接由-20 0C 直接至37 0C 解冻，因温度改变大大，容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。
4.heat-inactivation 是指56 0C，30 分钟加热已完全解冻之血清。加热过程中须规则摇晃均匀。比热处理之目的是使血清中之补体成份(complement) 去活化。除非必须，一般不建议作此热处理，因为会造成沈淀物之显著增多，且会影响血清之品质，补体参与之反应有:cvtolytic activities. contraction of smooth muscle. release of histamine from mast cells and platelets. enhanced phagocytosis. chemotaxis and activation of lymphocytic and macrophage cell type
5.勿将血清置干37 oC 太久，若在37 oC 放置太久，血清会变得混冲，同时血清中许多较 不稳定之成份亦会因此受到破坏，而影响血清之品质。
6.血清之沈淀物
1.释驾物:发生之原因有许多种，但普谝之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein)变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白
(fibrin)造成，这些将絮沈淀物不会影响血清本身之品质，若欲减少这些凝絮沈淀物，可用离心3000rpm，5 min 去除，或离心后上清沥可以加入培养基中一起过滤，不建议用过滤步骤去除这些舒驾沈淀物，因为会阳塞过滤膜。
2.显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清，沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点"，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在37 oC 中欲培养此“微生物”，但在37oC 环境下，又会使此沈淀物增多，更会
吴认为微生物之增殖，但以培美细菌之培美其检测，以没有污边，一般而言，此小坐点应不会影响细胞之生长，但若怀疑上
血清之品质，应立即停用，更换另一批号的血清。
7.血清之生长测试
1.材料:
1.MDCKcell(ATCC CCL-34或CCRC 60004)
2.a-MEM (alpha modified minimal essential medium.GibcoBRL12000-022)
3.6-well TC plate (or 35mm TC dish)
4. methanol
5.qlacial acetic acid
6.10% Giemsa solution(GibcoBRL10092-013)
2.步骤:
1 以a-MFM with 10 % FRS(三咖试过)培美MDCK 细胞干T75 fask 至80% confluency.
2.以trypsin-EDTA 处理细胞，离心后，加入适量不加血清之a-MEM 制成细胞县浮液，并测细胞浓度。以不加血清之a-MEM稀释细胞浓度为1x102 活细胞数/m
3.将1 ml 细胞悬浮液接种入6-well plate 中，并另加入1 ml 含不同浓度的血清(20 %，10%，4%，2%、1%.0.4%)之a MEM，使血清最终浓度为10%，5%，2%，1%，0.5 %，0.2 %。用已测试过之血清同时进行对照组试验。
4.37 oC，5 % CO2 培养箱培养5-7 天，期间不需更换培养基，待细胞群落大到可以肉眼观察，而群落间不互相接触即可。
5.去除培养基，加入1ml Carnoy’s 固定液(甲醇:Bing醋酸=3:1)，室温下静詈10min
6.去除固定液，水洗二次。
7.加入1 ml 10 % Giemsa solution，，室温下静置染色2-3min
8.去除染液，水洗二次。
9.以肉眼计数群落数
10.计算SPE(Serum Plating Efficiency):SPE =( no. of colonies / well)/ 100 x 100 %
11.计算RPE(Relative Platina Efficiency):SPE =[ total colonies of six well (test)/Total colonies of six well (control)1x100%
3.比较各浓度血清培养基之RPE，即可得知待测血清对细胞生长的影响。
4.订购多量同一批号的优良血清，置于-700C保存之
十.冷冻细胞活化
1.冷冻细胞之活化原则为快速解冻，以避免冰晶重新结晶而对细胞造成伤害，导致细胞之死亡。
2.细胞活化后，约需数日，或继代一至二代，其细胞生长或特性表现才会恢复正常(例如产生单株抗,体或是其它蛋白质)。
3.材料
137 oC 恒温水槽2 新鲜培养基
3无菌吸管/离心管/培养瓶4 液氮或干冰容器
4.步骤:
1操作人员应戴防护面置及手套，防一冷冻管可能爆裂之伤害
2 自液氮或干冰容器中取出冷冻管，检查盖子是否旋紧，由于热胀冷缩过程，此时盖子易松掉。3 将新鲜培养基置干37°℃ 水槽中回温，回温后喷以70%酒精并擦拭之，移入无菌操作台内。
4 取出冷冻管，立即放入37℃ 水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，以70% ethanol 擦拭保存管外部移入无菌操作台内。
5 取出0.9 ml 解冻之细胞县浮液，缓缓加入有培养基之培养容器内(稀释比例为1:10~1:15)，混合均匀，放入CO2培养箱培养，另取0.1 ml 解冻细胞县浮液作存活测试。
6解冻后是否立即去除冷冻保护剂(例如DMSO或glycerol)，依细胞种类而异，一般而言，大都不需要立即去除冷冻保护剂，惟若要立即去除，则将解冻之细胞县浮液加入含有5-10 ml培养基之离心管内，离心1000rpm.5 分钟，移去上清液。加入新鲜培养基，混合均匀，放入CO2培养箱培养。
7 若不需立即去除冷冻保存剂，则在解冻培养后隔日更换培养基，

十一.细胞传代培养
1.细胞生长至高密度时，即须分殖至新的培养瓶中，一般稀释比例为1:3 至1:6，依细胞种类而异。
2.材料:
1.无菌磷酸生理缓冲液(Dulbecco’s phosphate-buffered saline.Ca++/Mg++free. D-PBS.GibcoBRL 21600-010
2. trypsin-EDTA solution (0.05% trypsin-0.53mM EDTA-4Na,GibcoBRL25300-062):以10ml分装于15ml无菌离心管中，保存于-20 oC，使用前放在370C 水槽回温。
3.新鲜培养基
4.无菌吸管/离心管/培养瓶
3.步骤:
1.附着型胞(adherent cell)
1.吸掉旧培养液。
2.用D-PBS 洗涤细胞一至二次。
3加入trypsin-EDTA溶液(1ml/25cm2.2ml/75cm2)，37oC作用数分钟，于倒立显微镜下观察，当细胞将要分离而呈现圆粒状时，吸掉trypsin-EDTA 溶液。(若不移去trypsin-EDTA，则在trypsin-EDTA作用后，加入适量含血清之新鲜培养基终止 trypsin 作用，离心后再吸掉上清液。)
4.轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量之新鲜培养基，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，混和均匀后，依稀释比例转移至新的培养瓶中，以正常培养条件培养。
2.悬浮型细胞(suspension cel
1.吸出细胞培养液，放入离心管中，离心1000 rpm5分钟。
2.吸掉上清液，加入适量之新鲜培养基，混和均匀后，依稀释比例转移至新的培养瓶中，以正常培养条件培养。
3.融合瘤(hybridoma)
1.有些hybridoma cell 需培养三天以上才会产生抗体，若是更换培养基，则可能会失去抗体。因此继代培养不需离心后更换培养基，直接添加新鲜培养基稀释细胞浓度即可。若体积太大，可倾斜放置，或分殖至新培养瓶中。

中科腾宇（广州）科技技术有限公司为SERANA广东华南总代理，可联系咨询电话：13247571155（微信同号），QQ：2133177596