hPSC来源心肌细胞iCM-H1产品信息
Cat NO: IMI-CM01H1
基本信息细胞名称: iCM-H1,人胚胎干细胞(H1)来源心肌细胞
种属来源:人细胞来源:人胚胎干细胞 H1
细胞形态:细胞胞体则呈现不规则形状,如多角形,部分细胞有聚集倾向,具有搏动能力。
生长特性:贴壁生长
培养基::CM 维持培养基(含 CM 维持基础培养基,货号 IMI-CM01M1 ;CM 维持培养基补充剂(25×),货号 IMI-CM01MA )
生长条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件:心肌细胞冻存液(货号 IMC-705 ),液氮储存
支原体检测:无
规格:1×106 个细胞
产品概述:hPSC-心肌细胞是从人类多能干细胞(hPSC)分化得来,该细胞具有搏动能力,能表达心肌细胞的特异性 Marker(如 cTNT 等)
hPSC来源心肌细胞iCM-H1培养操作
hPSC来源心肌细胞iCM-H1复苏步骤
将含有 1 mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 4 mLCM 维持培养基(含 10μM IMC-014-Y)混合均匀。在 1000 rpm 条件下离心 3 min,弃去上清液,加 1-2 mL CM 维持培养基(含 10μM IMC-014-Y)后混匀。然后将所有细胞悬液加入含适量 CM 维持培养基(含 10μM IMC-014-Y)的基质胶包被的六孔板(1 孔)或 35mm 皿中培养过夜。24h 后,换成不含 IMC-014-Y 的 CM 维持培养基,视培养基颜色或隔 2 天换液。
hPSC来源心肌细胞iCM-H1传代步骤
a、弃去培养基,每孔加入 1mL 心肌细胞消化液(货号 IMI-M001X),置于 37℃培养箱消化 1-2 h。
b、1-2 h 后每孔加入等量 CM 维持培养基(含 10μM IMC-014-Y),轻轻吹打细胞,使细胞解离成单细胞。
c、将细胞悬液收集到 15 mL 离心管中,室温下 300 g 离心 5 min。
d、仔细抽吸上清液,不干扰细胞,用 1mL 恢复室温的 CM 维持培养基重悬细胞(含 10μM IMC-014-Y),轻轻地上下移液以确保细胞溶液均匀。
e、使用 CM 维持培养基(含 10μM IMC-014-Y)稀释细胞,将细胞以 1:1 比例接种到基质胶包被的六孔板或 35mm 皿中培养过夜(按底面积算,1 个 T25 相当于六孔板 2.5 个孔,六孔板 1 孔可传 12 孔板的 2 孔,24 孔板的 4 孔,96 孔板的 6 孔)。24h 后,换成不含 IMC014-Y 的 CM 维持培养基,视培养基颜色或隔 2 天换液。
hPSC来源心肌细胞iCM-H1培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 客户可购买逸漠生物 CM 维持培养基(含 CM 维持基础培养基,货号 IMI-CM01M1 ;CM维持培养基补充剂(25×),货号 IMI-CM01MA)。
5. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
6.该细胞仅供科研使用。
备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。