多能干细胞免疫荧光检测试剂盒(Oct4, 兔抗, 红色荧光)

碧云天生产的多能干细胞免疫荧光检测试剂盒(Oct4, 兔抗, 红色荧光)，英文名为Pluripotent Stem Cell Immunofluorescence Assay Kit (Oct4 Rabbit mAb, Red)，是一种通过免疫荧光染色法检测多能干细胞未分化(undifferentiated)状态的标志物Oct4的多能干细胞检测试剂盒。

本试剂盒中的Oct4兔单抗特异性识别人或小鼠的Oct4，可以结合荧光显微镜或高内涵筛选(High content screening, HCS)等，广泛应用于iPS重编程效果的判定，多能干细胞的干性(stemness)评估，以及干细胞的分化检测等。

本试剂盒提供了固定液、洗涤液、封闭液、一抗、荧光标记二抗、细胞核荧光染色液、封片液，使用时不必再配制其它任何溶液。提供了细胞核荧光染色液，可以把细胞核染成蓝色荧光。使用本试剂盒检测小鼠胚胎干细胞E14TG2a、人类胚胎干细胞H9和小鼠成纤维细胞NIH3T3细胞的效果参考图1。

图1.碧云天多能干细胞免疫荧光检测试剂盒(Oct4, 兔抗, 红色荧光)检测小鼠胚胎干细胞E14TG2a、人类胚胎干细胞H9和NIH3T3细胞的染色效果图。ES-E14TG2a小鼠胚胎干细胞，去除MEF接种至铺被有BeyoEmbryo™ 0.1%明胶溶液(胚胎细胞培养级) (C0316)的六孔板中培养。H9人胚胎干细胞接种至BeyoEmbryo™ Human Vitronectin (胚胎细胞培养级) (C0318)铺被的六孔板中培养。均培养2-3天后使用本试剂盒做免疫荧光染色。NIH3T3作为阴性对照细胞核无红色荧光，而小鼠胚胎干细胞E14TG2a和人类胚胎干细胞H9细胞核呈现Oct4阳性染色。实际染色效果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，图中效果仅供参考。

本试剂盒中提供的封闭液为碧云天的QuickBlock™免疫染色封闭液，仅10分钟左右即可完成封闭。

使用本试剂盒染色后Oct4呈红色荧光，其最大激发波长为555nm，最大发射波长为565nm；细胞核呈蓝色荧光，其最大激发波长为364nm，最大发射波长为454nm。

Oct4基因也被称为Oct3、POU5F1、Oct3或Oct4，是POU转录因子家族中的一员。在鼠和人体内，它主要表达于胚胎干细胞及生殖干细胞中，对于维持胚胎干细胞的未分化状态和自我更新具有极其重要的作用，分化后的多能干细胞Oct4表达水平大幅下降[1,2]。

如果检测96孔板内的样品，本试剂盒可以检测100-500个样品(抗体重复使用0-4次)；如果用于检测6孔板内的样品，通常可以检测25-50个样品(抗体重复使用4-9次)；如果检测组织切片至少可以检测50个样品。

固定液、细胞核染色液(DAPI) -20ºC保存，其余试剂均4ºC保存，半年有效。其中驴抗兔555和细胞核染色液(DAPI)须避光保存。

固定液对人体有害，操作时请特别小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。

免疫荧光染色时，请注意回收使用过的一抗和二抗。回收后通常至少可以重复使用5次，如果出现浑浊、沉淀等异常现象，应停止使用。

需使用可以观察红色荧光和蓝色荧光的荧光显微镜或高内涵分析仪。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。