Matrix-Gel™基质胶(高浓度，不含酚红)

碧云天生产的Matrix-Gel™基质胶，英文名为Matrix-Gel™ Basement Membrane Matrix，即基底膜基质，又称ECM (Extracellular Matrix)或BME (Basement Membrane Extract)凝胶，不含乳糖脱氢酶增高病毒(Lactate dehydrogenase elevating virus, LDEV)。基质胶广泛用于血管生成、肿瘤细胞迁移、体内肿瘤模型的建立、3D肿瘤细胞模型和类器官(Organoid)等研究领域。本产品与Corning^® Matrigel^®性能基本一致，甚至更优，相应产品可以完全替代。

基质胶是从富含胞外基质蛋白的EHS (Engelbreth-Holm-Swarm)小鼠肿瘤中提取的基底膜基质，其主要成分为层粘连蛋白，还含有IV型胶原、硫酸肝素糖蛋白、巢蛋白、各种生长因子、组织纤溶酶原激活物和微量的基质金属蛋白酶等。全系列产品均不含乳酸脱氢酶增高病毒或其它小鼠和肿瘤来源的病毒。在室温条件下，基质胶可快速聚合形成具有生物学活性的三维(3D)培养基质，模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能，可促进血管内皮细胞、上皮细胞、肝细胞、神经元、黑色素瘤细胞、甲状腺细胞及毛囊细胞等不同细胞的附着、维持、生长与分化[1-6]，可用于对细胞形态、生化功能、迁移、侵袭和基因表达等的研究。

碧云天Matrix-Gel™基质胶系列产品有含/不含酚红的标准型(Standard)、低生长因子(Growth Factor Reduced, GFR)、高浓度(High Concentration, HC)、高浓度低生长因子(HC, GFR)、干细胞用(hESC-Qualified)、类器官用(For Organoid Culture)等不同生长因子、蛋白浓度含量、不同用途的多种类型的基质胶。不含酚红的Matrix-Gel™基质胶适用于荧光检测或显色反应等分析；低生长因子的Matrix-Gel™基质胶适用于对基质成分要求严格的实验，如细胞信号通路和细胞因子等的研究；高浓度的Matrix-Gel™基质胶适用于研究血管生成、肿瘤细胞迁移和体内肿瘤模型的建立等。可根据实验需求并参考下表选择合适的基质胶产品。

本基质胶的组成类似于保守的、早期发育的基底膜。本基质胶主要成分由约60%的层粘连蛋白(Laminin)，约30%的IV型胶原蛋白(Collagen IV)和约8%的巢蛋白(Entactin)组成[7-8]，其中Entactin是一种桥接分子，它能够与层粘连蛋白和IV型胶原蛋白相互作用，从而有助于细胞外基质分子结构组织的形成。除了主要成分外，基质胶中还包含一些蛋白聚糖以及生长因子，如硫酸肝素蛋白聚糖(Perlecan)、血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β (TGF-β)、表皮生长因子(EGF)、胰岛素样生长因子(IGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、组织纤溶酶原激活物(PLAT)及肿瘤中自然存在的生长因子，另外还有残留的肿瘤细胞来源的基质金属蛋白酶等[9-10]。

本基质胶在室温条件下快速聚合。本基质胶在10℃以上会开始凝胶化，在22-37℃时，基质胶大分子间可以通过化学键互相结合，促使基质胶快速聚合形成3D凝胶基质，而在一定范围的低温(如4℃)条件下由于没有足够的能量促使化学键结合，基质胶呈现液体状态。

本基质胶可以满足不同的实验需要。基质胶的蛋白质浓度越高，粘稠度也越高。非高浓度基质胶的蛋白浓度为8-13mg/ml，高浓度基质胶的蛋白浓度为16-26mg/ml，基质胶最低成胶浓度为3mg/ml，为避免成胶不完全，用于体内研究的基质胶的终浓度不应低于4mg/ml。

本基质胶经严格的质量控制，品质高。每批次相关产品都经过严格的蛋白浓度、内毒素、凝胶、血管生成、肿瘤细胞3D培养、类器官培养、生物活性、无菌性(细菌、真菌、病毒、支原体)等检测。

本系列基质胶产品在各个应用中的效果参见图1-图7。

图1. 碧云天Matrix-Gel™基质胶(高浓度,低生长因子) (C0386/C0387)用于免疫缺陷小鼠皮下成瘤实验的效果图。选择大小相近、生命体征相近的4-5周雄性裸鼠，分别接种HCT 116 (人结肠癌细胞)细胞悬液及1:1混合基质胶(高浓度)的HCT 116细胞悬液，细胞数量为每只裸鼠80万个细胞，经过11天饲养后分离取出肿瘤。与仅注射HCT 116细胞悬液的对照组相比，混合基质胶(高浓度)的HCT 116细胞悬液注射组小鼠的肿瘤体积明显更大，成瘤速度更快，成瘤效果更好。实际效果会因细胞种类、实验条件的不同而存在差异，本图仅供参考。

图2. 碧云天Matrix-Gel™基质胶(标准型) (C0371/C0372)和Matrix-Gel™基质胶(高浓度) (C0382/C0383)用于血管生成实验的效果图。分别使用未经稀释的Matrix-Gel™基质胶、Matrix-Gel™基质胶和DMEM按照2:1 (即66.7%)、1:1 (即50%)混合的混合液，取50μl平铺至96孔板中，待基质胶凝固后，加入约3万个细胞悬液，图A为Matrix-Gel™基质胶(标准型)用于HUVEC (人脐静脉内皮细胞)的血管生成效果，图B为Matrix-Gel™基质胶(高浓度)用于RLSEC (大鼠肝窦内皮细胞)的血管生成效果，培养时间为4小时，均可以观察到显著的管腔样结构。实际效果会因细胞种类、实验条件的不同而存在差异，本图仅供参考。

图3. 碧云天Matrix-Gel™基质胶(标准型)(C0371/C0372)用于Transwell侵袭实验的效果图。将基质胶1:8稀释，平铺在Transwell小室的上侧，37℃凝胶2小时后，加培养液水化30分钟，弃上清，在小室中加入约5万个细胞/孔的HCT 116 (人结肠癌细胞)细胞悬液，并把Transwell小室下侧浸没在含血清培养液中，培养48小时后经固定、结晶紫染色后的效果。实际效果会因细胞种类、实验条件的不同而存在差异，本图仅供参考。

图4. 碧云天Matrix-Gel™基质胶(低生长因子) (C0375/C0376)用于小鼠胆管(Bile duct)、气道上皮(Airway epithelium)类器官的培养效果图。分离小鼠胆管和气道上皮细胞，包埋于基质胶后，接种于培养板上进行诱导培养，建立原代小鼠胆管和气道上皮类器官。图A为小鼠胆管类器官培养4天的形态图，图B为小鼠气道上皮类器官培养4天的形态图，培养状态均良好。实际效果会因细胞种类、实验条件的不同而存在差异，本图仅供参考。

图5. 碧云天Matrix-Gel™基质胶(类器官用) (C0395/C0396)用于小鼠小肠(Small intestine)类器官的培养效果图。分离小鼠小肠隐窝细胞，包埋于基质胶后，接种于培养板上进行诱导培养，建立原代小鼠小肠类器官，并进行传代扩增。连续7代(P1-P7)传代后，类器官活力良好，增殖能力强，维持了明显的隐窝样结构特征(图A)和隐窝样的分枝结构(图B)。实际效果会因组织种类、实验条件的不同而存在差异，本图仅供参考。

图6. 碧云天Matrix-Gel™基质胶(标准型) (C0371/C0372)和Matrix-Gel™基质胶(高浓度) (C0382/C0383)用于3D肿瘤球形成实验的效果图。取状态良好的HepG2 (人肝癌细胞)和SGC-7901 (人胃癌细胞)细胞，胰酶消化后获得细胞悬液，分别与Matrix-Gel™基质胶(标准型)和Matrix-Gel™基质胶(高浓度)1:1混合后，滴加至96孔板中，待胶滴凝固后，添加含10% FBS的培养液，培养五天后，可以形成球体样结构。实际效果会因细胞种类、实验条件的不同而存在差异，本图仅供参考。

图7. 碧云天Matrix-Gel™基质胶(干细胞用) (C0391/C0392)用于ES细胞(Embryonic stem cells, ES cells)的培养效果图。使用Matrix-Gel™基质胶(干细胞用)培养ES细胞1-8天，显示Matrix-Gel™基质胶(干细胞用)可以满足ES细胞的培养需求，细胞生长状态良好。实际效果会因细胞种类、实验条件的不同而存在差异，本图仅供参考。

-20℃或以下避光保存，两年有效。初次解冻后请适当分装，避免反复冻融。

本产品干冰运输，解冻前为固态。若到货后泡沫盒中无干冰，且基质胶呈凝胶状而非液态化，请及时联系碧云天。到货后若不分装或直接用于实验，请立刻置于-20℃或以下温度避光保存。

本基质胶不可反复冻融。为保证基质胶的使用效果，如有必要请收到本产品后按照单次用量分装，尽可能减少冻融次数，或直接订购碧云天的1ml小包装的本产品。

基质胶须-20℃或以下避光保存，在保存过程中，本产品需维持在冻结状态。由于无霜冰箱的自动除霜功能可能影响冰箱内的温度，因此不建议将本产品储存在无霜冰箱中。

本基质胶的蛋白质浓度具有批次差异性，一般都标示在西林瓶的标签上，请根据标示的蛋白浓度、所需蛋白浓度，确定基质胶的用量以获得一致性结果。具体稀释浓度应根据实验进行优化。

使用本产品时应注意无菌操作，避免污染。解冻后，请将本产品放置在无菌的区域，在顶部喷洒70%乙醇消毒并风干。

解冻的基质胶避光放置于4℃冰箱或冰上可以保持30天左右的液态化，但仍建议解冻后就进行分装或用于相关实验。

由于二氧化碳和碳酸氢盐缓冲液以及酚红(如有)的作用，本基质胶在冻融的过程中可能会发生颜色的变化。颜色的变化是正常现象，不影响产品使用效果。

实验过程中拿取基质胶的时候需注意手不可接触基质胶部位的瓶身，避免体温引起的基质胶凝固，应用手指持住装有基质胶的瓶子/管子上方。

实验完毕后，剩余的基质胶不可留待下次使用。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。